雷公藤甲素對BALB-c哮喘小鼠IL-23-Th17軸的影響.pdf

1、[目的]：
　　研究雷公藤甲素對BALB/c哮喘小鼠IL-23-Th17軸的影響，探討其治療哮喘的作用及機制，為雷公藤甲素治療哮喘提供理論及依據(jù)。
　　[方法]：
　　56只6-8周齡雌性BALB/c小鼠隨機分為中性粒細胞性哮喘組(NA)、中性粒細胞性哮喘雷公藤甲素干預(yù)組(TLN)、中性粒細胞性哮喘地塞米松干預(yù)組(DXN)、嗜酸細胞性哮喘組(EA)、嗜酸細胞性哮喘雷公藤甲素干預(yù)組(TLE)、嗜酸細胞性哮喘地塞米松干預(yù)組

2、(DXE)和正常組(NC)，每組8只，分籠飼養(yǎng)。采用卵清蛋白(OVA)分別聯(lián)合脂多糖內(nèi)毒素(LPS)、氫氧化鋁(AL(OH)3)致敏方法建立支氣管哮喘小鼠模型并給予相應(yīng)治療。在末次激發(fā)24小時內(nèi)將小鼠處死，細胞計數(shù)肺泡灌洗液(BALF)中白細胞和嗜酸性粒細胞的總數(shù)目;ELISA檢測肺泡灌洗液(BALF)中IL-17、IL-23、RORγt的水平表達;HE染色左肺組織;免疫組化檢測左肺組織中IL-17蛋白表達;采用qRT-PCR檢測右肺組

3、織中IL-17、IL-23、RORγt mRNA的表達;流式細胞儀檢測各組小鼠外周血Th17細胞占CD4+T淋巴細胞的比率。所得的數(shù)據(jù)采用SPSS19.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計并分析。
　　[結(jié)果]：
　　1.TLN組、DXN組小鼠BALF中WBC總數(shù)及EOS總數(shù)均較NA組明顯下降(均P＜0.05)，但均明顯高于NC組（均P＜0.05），TLN組上述各指標均較DXN組下降(均P＜0.05); TLE組、DXE組小鼠BALF中WBC

4、總數(shù)及EOS總數(shù)均較EA組顯著下降(均P＜0.05)，但均明顯高于NC組（均P＜0.05），DXE組上述各指標均較TLE組下降，但兩者間差異無顯著性(均P＞0.05)。
　　2.TLN組、DXN組小鼠BALF中IL-17、IL-23、RORγt的表達水平均較NA組明顯下降(均P＜0.05)，但均明顯高于NC組（均P＜0.05），TLN組上述各指標均較DXN組降低，但兩者間差異無顯著性（均P＞0.05）;TLE組、DXE組小鼠BAL

5、F中IL-17、IL-23、RORγt的表達水平均較EA組顯著下降(均P＜0.05)，但均較NC組差異無顯著性(均P＞0.05)，DXE組上述各指標均較TLE組下降，但兩者間差異無顯著性(均P＞0.05)。
　　3.TLN組、DXN組小鼠肺組織中IL-17的蛋白表達水平均較NA組明顯下降(均P＜0.05)，但均明顯高于NC組(均P＜0.05)，TLN組的表達水平較DXN組下降，但兩者間差異無顯著性（均P＞0.05）;TLE組、DX

6、E組小鼠肺組織IL-17蛋白的表達水平均較EA組顯著下降，但均明顯高于NC組（均P＜0.05），DXE組的表達水平較TLE組下降，但兩者間差異無顯著性(均P＞0.05)。
　　4.TLN組、DXN組小鼠肺組織中IL-17 mRNA、IL-23 mRNA、RORγtmRNA的相對表達量均較NA組明顯下降(均P＜0.05)，但均明顯高于NC組(均P＜0.05)，TLN組上述各指標均較DXN組明顯下降，但兩者間差異無顯著性（均P＞0.0

7、5）;TLE組、DXE組小鼠肺組織中IL-17 mRNA、IL-23 mRNA、RORγt mRNA的相對表達量均較EA組顯著下降(均P＜0.05)，但均明顯高于NC組(分別為P＞0.05，P＜0.05，P＜0.05)，DXE組上述各指標均較TLE組下降，但兩者間差異無顯著性(均P＞0.05)。
　　5.TLN組、DXN組小鼠外周血Th17/CD4+T細胞的比率均較NA組明顯下降(均P＜0.05)，但均明顯高于NC組（均P＜0.0

8、5），TLN組上述各指標均較DXN組明顯下降，但兩者間差異無顯著性(均P＞0.05); TLE組、DXE組小鼠外周血Th17/CD4+T細胞的比率均較EA組顯著下降(均P＜0.05)，但均明顯高于NC組(均P＜0.05)，DXE組上述各指標均較TLE組下降，但兩者間差異無顯著性(均P＞0.05)。
　　6.IL-17、IL-23、RORγt、IL-17蛋白表達、IL-17mRNA、IL-23mRNA、RORγt mRNA、Th17

9、/CD4+與BALF中WBC、EOS的相關(guān)分析:IL-17與BALF中WBC、EOS呈現(xiàn)正相關(guān)，r=0.894、0.762; IL-23與BALF中WBC、EOS呈現(xiàn)正相關(guān)，r=0.908、0.535; RORγt與BALF中WBC、EOS呈現(xiàn)正相關(guān)，r=0.908、0.498; IL-17蛋白表達與BALF中WBC、EOS呈現(xiàn)正相關(guān)，r=0.725、0.602;IL-17mRNA與BALF中WBC、EOS呈現(xiàn)正相關(guān)，r=0.932、0

10、.683; IL-23mRNA與BALF中WBC、EOS呈現(xiàn)正相關(guān)，r=0.929、0.650; RORγtmRNA與BALF中WBC、EOS呈現(xiàn)正相關(guān)，r=0.938、0.624; Th17/CD4+與BALF中WBC、EOS呈現(xiàn)正相關(guān)，r=0.898、0.785(allP=0.000)。
　　7.IL-17、RORγt、IL-17蛋白表達、IL-17mRNA、RORγt mRNA、Th17/CD4+與IL-23、IL-23mR

11、NA的相關(guān)分析:IL-17與IL-23、IL-23mRNA呈現(xiàn)正相關(guān)，r=0.933、0.972;RORγt與IL-23、IL-23mRNA呈現(xiàn)正相關(guān)，r=0.976、0.963; IL-17蛋白表達與IL-23、IL-23mRNA呈現(xiàn)正相關(guān)，r=0.683、0.718; IL-17mRNA與IL-23、IL-23mRNA呈現(xiàn)正相關(guān)，r=0.955、0.387; RORγtmRNA與IL-23、IL-23mRNA呈現(xiàn)正相關(guān)，r=0.98

12、0、0.994; Th17/CD4+與IL-23、IL-23mRNA呈現(xiàn)正相關(guān)，r=0.841、0.899(all P=0.000)。
　　8.IL-17、IL-17蛋白表達、IL-17mRNA、Th17/CD4+與RORγt、RORγ tmRNA的相關(guān)分析:IL-17與RORγt、RORγtmRNA呈現(xiàn)正相關(guān)，r=0.915、0.967;IL-17蛋白表達與RORγt、RORγt mRNA呈現(xiàn)正相關(guān)，r=0.651、0.730;