鮑曼不動桿菌16SrRNA甲基化酶基因檢測及流行病學分析.pdf

1、鮑曼不動桿菌是院內感染的常見致病菌之一，隨著多重耐藥菌株的出現和增加，聯(lián)合用藥治療常常作為臨床治療的策略。氨基糖苷類藥物因具有高效、廣譜、殺菌的作用，為聯(lián)合用藥的選擇之一。以往對氨基糖苷類耐藥機制的研究多集中在產生氨基糖苷類修飾酶基因上。2003年起，一種新的介導氨基糖苷類耐藥機制--質粒介導的16SrRNA甲基化酶基因被報道。迄今在革蘭陰性菌中共檢出7種16SrRNA甲基化酶基因：armA、rmtA、rmtB、rmtC、rmtD、rm

2、tE和npmA。與修飾酶耐藥機制不同，該酶直接作用于氨基糖苷類藥物作用的靶位，使藥物與靶位的親和力下降，導致泛氨基糖苷類高水平耐藥。ERIC-PCR方法建立于1991年，最初應用于腸桿菌科的鑒定和流行病學調查，1997年開始應用于不動桿菌屬的研究。
　　目的：了解天津地區(qū)分離的鮑曼不動桿菌耐藥表型及7種16SrRNA甲基化酶基因的攜帶情況；采用ERIC-PCR方法對分離自同期3名入住不同ICU患者不同部位的8株鮑曼不動桿菌進行同源

3、性分析。
　　方法：對天津地區(qū)不同年份收集的兩部分鮑曼不動桿菌共204株(2006～2009年組52株，2010～2011年組152株)，采用全自動藥敏鑒定系統(tǒng)、瓊脂稀釋法或紙片擴散法(K-B法)測定菌株的藥敏情況，對2010～2011年組菌株進行臨床資料分析；聚合酶鏈反應(PCR)對204株菌擴增7種16SrRNA甲基化酶基因并進行序列分析；ERIC-PCR方法對同期來源于3例患者不同部位的8株鮑曼不動桿菌進行同源性調查。

4、>　　結果：
　　1、204株鮑曼不動桿菌對哌拉西林、三四代頭孢菌素、碳青霉烯類、氨基糖苷類、環(huán)丙沙星的耐藥率高于50％，氨芐西林/舒巴坦和復方新諾明的耐藥率高于40％，左氧氟沙星為34.80％，頭孢哌酮/舒巴坦耐藥率最低，為12.25％，未發(fā)現多粘菌素B耐藥菌株。同時對慶大霉素、阿米卡星耐藥株106株。多重耐藥株115株，占56.37％(115/204)。
　　2、2010～2011年組菌株除多粘菌素B外，對其余13種抗菌

5、藥物的耐藥率均高于2006～2009年組，其中對慶大霉素、阿米卡星的耐藥率分別由44.23％和42.31％上升至57.89％和55.26％。碳青霉烯類、頭孢哌酮/舒巴坦的耐藥率也分別由36.54％和1.92％上升至57.89％和15.79％。多重耐藥株所占的比例由40.38％(21/52)上升至61.84％(94/152)。除多粘菌素B外，ICU來源的菌株對其余13種抗菌藥物的耐藥率均明顯高于非ICU來源的菌株。ICU中多重耐藥株占94

6、.37％(67/71)，明顯高于非ICU中所占的比例33.33％(27/81)。
　　3、標本分布：ICU病區(qū)鮑曼不動桿菌分離率高，占46.71％。
　　4、armA基因陽性株共89株，占43.63％(89/204)，均同時對阿米卡星和慶大霉素耐藥，在同時對阿米卡星和慶大霉素耐藥株中占83.96％(89/106)。armA基因陽性株均為多重耐藥株，在全部多重耐藥株中占77.39％(89/115)，未檢出其他6種16SrRNA

7、甲基化酶基因。armA陽性株組對除多粘菌素B以外的其余13種抗菌藥物耐藥率及多重耐藥菌株的比例明顯高于armA陰性株組。ICU中鮑曼不動桿菌armA檢出率為73.24％(52/71)，高于非ICU中armA的檢出率25.93％(21/81)。
　　5、分離自A、B、C3名患者的8株鮑曼不動桿菌被分為5型，來源于A患者的痰、咽拭子、傷口分泌物及C患者靜脈導管的4株菌為同一基因型，與來源于B患者腦脊液的菌株存在基因型相似或相關；其余3

8、株為完全不同的基因型。
　　結論：
　　1、天津地區(qū)鮑曼不動桿菌對常用抗菌藥物耐藥率高，多重耐藥株所占比例也較高。
　　2、鮑曼不動桿菌對哌拉西林、三、四代頭孢菌素、碳青霉烯類及氨基糖苷類耐藥嚴重，對左氧氟沙星、頭孢哌酮/舒巴坦的耐藥率相對較低，未發(fā)現對多粘菌素B耐藥菌株。
　　3、2010～2011年組鮑曼不動桿菌的耐藥率和多重耐藥株所占比例高于2006～2009年組。
　　4、ICU來源的菌株較非ICU

9、來源的耐藥嚴重，多重耐藥株所占的比例也較高。
　　5、天津地區(qū)鮑曼不動桿菌中存在armA基因，檢出率43.63％(89/204)，未檢出rmtA、rmtB、rmtC、rmtD、rmtE、npmA基因。armA基因陽性株均為多重耐藥株，均同時對阿米卡星和慶大霉素耐藥。armA陽性株對常用抗菌藥物的耐藥率明顯高于armA陰性株。鮑曼不動桿菌armA基因陽性檢出率ICU病區(qū)高于非ICU病區(qū)。
　　6、ERIC-PCR分型方法是一種