鮑曼不動桿菌16SrRNA甲基化酶基因檢測及流行病學(xué)分析.pdf

1、鮑曼不動桿菌是院內(nèi)感染的常見致病菌之一，隨著多重耐藥菌株的出現(xiàn)和增加，聯(lián)合用藥治療常常作為臨床治療的策略。氨基糖苷類藥物因具有高效、廣譜、殺菌的作用，為聯(lián)合用藥的選擇之一。以往對氨基糖苷類耐藥機制的研究多集中在產(chǎn)生氨基糖苷類修飾酶基因上。2003年起，一種新的介導(dǎo)氨基糖苷類耐藥機制--質(zhì)粒介導(dǎo)的16SrRNA甲基化酶基因被報道。迄今在革蘭陰性菌中共檢出7種16SrRNA甲基化酶基因：armA、rmtA、rmtB、rmtC、rmtD、rm

2、tE和npmA。與修飾酶耐藥機制不同，該酶直接作用于氨基糖苷類藥物作用的靶位，使藥物與靶位的親和力下降，導(dǎo)致泛氨基糖苷類高水平耐藥。ERIC-PCR方法建立于1991年，最初應(yīng)用于腸桿菌科的鑒定和流行病學(xué)調(diào)查，1997年開始應(yīng)用于不動桿菌屬的研究。
　　目的：了解天津地區(qū)分離的鮑曼不動桿菌耐藥表型及7種16SrRNA甲基化酶基因的攜帶情況；采用ERIC-PCR方法對分離自同期3名入住不同ICU患者不同部位的8株鮑曼不動桿菌進行同源

3、性分析。
　　方法：對天津地區(qū)不同年份收集的兩部分鮑曼不動桿菌共204株(2006～2009年組52株，2010～2011年組152株)，采用全自動藥敏鑒定系統(tǒng)、瓊脂稀釋法或紙片擴散法(K-B法)測定菌株的藥敏情況，對2010～2011年組菌株進行臨床資料分析；聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)對204株菌擴增7種16SrRNA甲基化酶基因并進行序列分析；ERIC-PCR方法對同期來源于3例患者不同部位的8株鮑曼不動桿菌進行同源性調(diào)查。

4、>　　結(jié)果：
　　1、204株鮑曼不動桿菌對哌拉西林、三四代頭孢菌素、碳青霉烯類、氨基糖苷類、環(huán)丙沙星的耐藥率高于50％，氨芐西林/舒巴坦和復(fù)方新諾明的耐藥率高于40％，左氧氟沙星為34.80％，頭孢哌酮/舒巴坦耐藥率最低，為12.25％，未發(fā)現(xiàn)多粘菌素B耐藥菌株。同時對慶大霉素、阿米卡星耐藥株106株。多重耐藥株115株，占56.37％(115/204)。
　　2、2010～2011年組菌株除多粘菌素B外，對其余13種抗菌

5、藥物的耐藥率均高于2006～2009年組，其中對慶大霉素、阿米卡星的耐藥率分別由44.23％和42.31％上升至57.89％和55.26％。碳青霉烯類、頭孢哌酮/舒巴坦的耐藥率也分別由36.54％和1.92％上升至57.89％和15.79％。多重耐藥株所占的比例由40.38％(21/52)上升至61.84％(94/152)。除多粘菌素B外，ICU來源的菌株對其余13種抗菌藥物的耐藥率均明顯高于非ICU來源的菌株。ICU中多重耐藥株占94

6、.37％(67/71)，明顯高于非ICU中所占的比例33.33％(27/81)。
　　3、標(biāo)本分布：ICU病區(qū)鮑曼不動桿菌分離率高，占46.71％。
　　4、armA基因陽性株共89株，占43.63％(89/204)，均同時對阿米卡星和慶大霉素耐藥，在同時對阿米卡星和慶大霉素耐藥株中占83.96％(89/106)。armA基因陽性株均為多重耐藥株，在全部多重耐藥株中占77.39％(89/115)，未檢出其他6種16SrRNA

7、甲基化酶基因。armA陽性株組對除多粘菌素B以外的其余13種抗菌藥物耐藥率及多重耐藥菌株的比例明顯高于armA陰性株組。ICU中鮑曼不動桿菌armA檢出率為73.24％(52/71)，高于非ICU中armA的檢出率25.93％(21/81)。
　　5、分離自A、B、C3名患者的8株鮑曼不動桿菌被分為5型，來源于A患者的痰、咽拭子、傷口分泌物及C患者靜脈導(dǎo)管的4株菌為同一基因型，與來源于B患者腦脊液的菌株存在基因型相似或相關(guān)；其余3

8、株為完全不同的基因型。
　　結(jié)論：
　　1、天津地區(qū)鮑曼不動桿菌對常用抗菌藥物耐藥率高，多重耐藥株所占比例也較高。
　　2、鮑曼不動桿菌對哌拉西林、三、四代頭孢菌素、碳青霉烯類及氨基糖苷類耐藥嚴重，對左氧氟沙星、頭孢哌酮/舒巴坦的耐藥率相對較低，未發(fā)現(xiàn)對多粘菌素B耐藥菌株。
　　3、2010～2011年組鮑曼不動桿菌的耐藥率和多重耐藥株所占比例高于2006～2009年組。
　　4、ICU來源的菌株較非ICU

9、來源的耐藥嚴重，多重耐藥株所占的比例也較高。
　　5、天津地區(qū)鮑曼不動桿菌中存在armA基因，檢出率43.63％(89/204)，未檢出rmtA、rmtB、rmtC、rmtD、rmtE、npmA基因。armA基因陽性株均為多重耐藥株，均同時對阿米卡星和慶大霉素耐藥。armA陽性株對常用抗菌藥物的耐藥率明顯高于armA陰性株。鮑曼不動桿菌armA基因陽性檢出率ICU病區(qū)高于非ICU病區(qū)。
　　6、ERIC-PCR分型方法是一種