多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌耐藥基因及分子流行病學(xué)研究.pdf

1、鮑曼不動(dòng)桿菌是一類非發(fā)酵的革蘭陰性桿菌，為條件致病菌。廣泛存在于水、土壤、醫(yī)院環(huán)境和人體皮膚表面，是醫(yī)院感染的重要致病菌之一，主要引起獲得性肺炎特別是呼吸機(jī)相關(guān)性肺炎、菌血癥、尿路感染、繼發(fā)性腦膜炎等。隨著廣譜抗菌藥物和免疫抑制劑大量使用，對(duì)常用的β-內(nèi)酰胺類、氨基糖苷類、氟喹諾酮類等抗菌藥物同時(shí)耐藥的多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌分離率明顯增多，并在醫(yī)院內(nèi)廣泛流行，給臨床抗感染治療帶來(lái)極大的麻煩，同時(shí)對(duì)醫(yī)院感染控制提出了新的挑戰(zhàn)。對(duì)多重耐藥鮑曼

2、不動(dòng)桿菌(Multi-drug resistant Acinetobacter baumanniiMDRAB)的藥敏試驗(yàn)和醫(yī)院科室分布情況進(jìn)行統(tǒng)計(jì)和分析，并檢測(cè)相關(guān)耐藥基因和對(duì)菌株進(jìn)行同源性分析，從而指導(dǎo)醫(yī)生合理使用抗菌藥物，探討我院多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌產(chǎn)生的耐藥機(jī)制，為我院預(yù)防與控制院內(nèi)感染提供理論依據(jù)，給流行病學(xué)研究奠定基礎(chǔ)。
　　本研究收集四川醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院2013年9月至2014年9月臨床分離的62株非重復(fù)多重耐藥鮑

3、曼不動(dòng)桿菌。利用MicroScan WalkAway96 Plus全自動(dòng)微生物鑒定/藥敏測(cè)試系統(tǒng)進(jìn)行鑒定、驗(yàn)證，瓊脂稀釋法檢測(cè)菌株對(duì)23種抗生素的最低抑菌濃度(MIC)，利用聚合酶鏈反應(yīng)(Polymerase Chain Reaction，PCR)檢測(cè)菌株的6種相關(guān)耐藥基因(TEM、SHV、VIM、IMP、OXA-23、OXA-24)的攜帶情況，將擴(kuò)增所得的陽(yáng)性產(chǎn)物送上海鉑尚生物技術(shù)有限公司測(cè)序，將測(cè)序所得序列和GenBank數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行

4、對(duì)比分析，并采用脈沖場(chǎng)凝膠電泳(Pulsed Field Gel Electrophoresis，PFGE)對(duì)62株多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌進(jìn)行分子分型并分析其同源性。
　　結(jié)果顯示:62株多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌主要分離于痰液，其中40株分離于痰液標(biāo)本，11株分離于分泌物，其余為分離于血液標(biāo)本4株、中段尿標(biāo)本3株、腦脊液標(biāo)本2株和胸水標(biāo)本2株。臨床科室分布分別是重癥監(jiān)護(hù)室24株，呼吸內(nèi)科10株，神經(jīng)外科8株，余下菌株來(lái)源于其他臨床科室。

5、62株多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)青霉素類的耐藥率均為100％;對(duì)頭孢菌素中頭孢曲松鈉耐藥率為96.8％，其余均為100％。對(duì)氨芐西林/舒巴坦的耐藥率為80.6％，對(duì)碳青霉烯類抗生素中亞胺培南和美羅培南的耐藥率為90.3％和88.7％，對(duì)氨基糖苷類抗生素中慶大霉素、阿米卡星、妥布霉素的耐藥率分別為93.5％、80.6％和53.2％，對(duì)喹諾酮類抗生素中環(huán)丙沙星、左氧氟沙星、加替沙星的耐藥率分別為100％、85.5％和64.5％，對(duì)多粘菌素和多粘

6、菌素B的耐藥率為12.9％和11.3％。對(duì)四環(huán)素、米諾環(huán)素、替加環(huán)素的耐藥率分別為90.3％、17.7％、3.2％。對(duì)磺胺甲惡唑和利福平的耐藥率為69.4％和92％。6種耐藥基因共檢出4種，其中TEM陽(yáng)性有52株，陽(yáng)性率為83.9％，VIM陽(yáng)性有53株，陽(yáng)性率為85.5％，IMP陽(yáng)性有41株，陽(yáng)性率為66.1％，OXA-23陽(yáng)性有58株，陽(yáng)性率為93.5％。4種耐藥基因陽(yáng)性擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)測(cè)序后與GenBank中已提交的相應(yīng)基因序列的同源性為

7、98％-100％。PFGE將62株多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌分為4型，A型和B型為主要克隆株。A型包括4個(gè)亞型共32株，B型有2個(gè)亞型共19株，C克隆有8株。D克隆有3株。
　　以上研究表明我院分離的多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌主要分布在呼吸內(nèi)科、重癥監(jiān)護(hù)室、神經(jīng)外科，呼吸道感染在感染病例中為主，與接受各種侵襲性操作有關(guān)。多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌的耐藥情況十分嚴(yán)峻，62株耐藥菌株對(duì)23種抗生素的耐藥水平高于全國(guó)細(xì)菌耐藥監(jiān)測(cè)網(wǎng)的水平。OXA-23在6

8、2株多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌中的攜帶率最高，為93.5％。并且攜帶VIM、TEM、IMP菌株也高達(dá)85.5％、83.9％、66.1％，說(shuō)明攜帶多種耐藥基因是在多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌的中十分普遍。
　　我院鮑曼不動(dòng)桿菌PFGE分型分為4型，以A型為主，共有32株占51.6％，主要在重癥監(jiān)護(hù)室、呼吸內(nèi)科、神經(jīng)外科、骨科、血液科5個(gè)病區(qū)流行，其次為B型，主要集中在呼吸內(nèi)科、重癥監(jiān)護(hù)室和兒科。多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌在我院各臨床科室廣泛分布并流行傳