腺病毒介導(dǎo)的腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子對大鼠脊髓急性損傷后神經(jīng)細(xì)胞保護(hù)的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、背景:脊髓損傷分為原發(fā)性損傷和繼發(fā)性損傷,原發(fā)性損傷是受傷瞬間對脊髓造成的不可逆損傷,很少有脊髓損傷是對脊髓的直接物理性橫斷,大多是挫傷、壓迫或者牽拉造成的損傷,所以仍有部分脊髓是完好的,這就給恢復(fù)神經(jīng)功能提供了可能。既往的研究表明,脊髓損傷后局部神經(jīng)營養(yǎng)因子不足是脊髓損傷后修復(fù)面臨的主要問題之一。在這些研究中,腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)的作用尤為矚目。
  目的:本研究將以脊髓損傷SD大鼠為模型,通過導(dǎo)入腺病毒介導(dǎo)的腦源性神

2、經(jīng)營養(yǎng)因子(Adv-BDNF),上調(diào)大鼠BDNF基因的表達(dá),并最終達(dá)到修復(fù)神經(jīng)細(xì)胞、改善大鼠運(yùn)動(dòng)功能的目的。
  方法:將實(shí)驗(yàn)大鼠分為G1-4組,其中G1-3組手術(shù)創(chuàng)建大鼠急性脊髓壓迫損傷模型,G4組為假手術(shù)組。脊髓損傷模型建立后,于G1組大鼠損傷節(jié)段頭端5mm處注射Adv-BDNF,G2組大鼠同樣位置注射Adv-eGFP,G3組大鼠注射PBS做為對照。于術(shù)后1、3、7、14、28天取各組脊髓標(biāo)本,通過檢測BDNFmRNA及蛋白評

3、價(jià)BDNF表達(dá)情況,標(biāo)本行染色鏡檢評價(jià)組織損傷程度。同時(shí)通過行BBB評分評價(jià)大鼠運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)情況。
  結(jié)果:術(shù)后3天取G2組脊髓切片鏡檢,見GFP散布整個(gè)頭端脊髓,提示腺病毒基因逆行調(diào)控滿意。PCR及western blot結(jié)果提示在對照組(G3)中,BDNF的表達(dá)在傷后24h就顯著增加,但是3天后即減少,而且,這種BDNF的低表達(dá)狀態(tài)持續(xù)時(shí)間長達(dá)1星期。在實(shí)驗(yàn)組1(G1)中,因損傷導(dǎo)致的BDNF表達(dá)下調(diào)較對照組(G3)要小很多

4、,并且在第2星期和第4星期有明顯的恢復(fù)表現(xiàn)。在術(shù)后1星期時(shí),G1組的BDNF表達(dá)明顯高于G2組,而且無論是G1還是G2組均表現(xiàn)出比對照組(G3)更高的BDNF表達(dá)。G1組的標(biāo)本在光鏡下觀察到的空腔較對照組(G3)要小,G2組在術(shù)后4周時(shí)觀察到的空腔最小,但是G1組的正常脊髓實(shí)質(zhì)較G2組更多。BBB評分的結(jié)果表明,所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的BBB評分均表現(xiàn)出了逐步好轉(zhuǎn)的跡象,在術(shù)后第7,14,28天時(shí), G1組的BBB評分較G2組和對照組(G3)更高

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