新生大鼠缺氧缺血性腦損傷AQP-4表達(dá)及依達(dá)拉奉治療效果的研究.pdf

1、目的：新生兒缺氧缺血性腦損傷(hypoxic-ischemic brain damage，HIBD)是指各種圍生期窒息而導(dǎo)致腦的缺氧缺血性損害，而腦水腫是其病理生理改變中的重要環(huán)節(jié)之一，因此了解腦水腫產(chǎn)生機(jī)理并給予及時(shí)處理十分重要。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)建立新生大鼠缺氧缺血性腦損傷(HIBD)模型，觀察依達(dá)拉奉對(duì)新生大鼠HIBD后腦組織水通道蛋白-4(AQP-4)的表達(dá)變化及依達(dá)拉奉對(duì)其治療效果的影響，進(jìn)一步探討其對(duì)新生大鼠HIBD的保護(hù)作用及其可

2、能的保護(hù)機(jī)制，為其在新生兒缺氧缺血性腦病(hypoxic-ischemic encephalopathy，HIE)的臨床運(yùn)用提供理論依據(jù)。
　　 方法：新生7日齡Wistar大鼠120只隨機(jī)分為假手術(shù)組、HIBD模型組及依達(dá)拉奉干預(yù)組，每組各40只。HIBD模型組和依達(dá)拉奉干預(yù)組均先制備HIBD模型，各組再根據(jù)處死時(shí)間不同又分為5個(gè)亞組：6h組、12h組、24h組、3d組及5d組，每亞組各8只。模型采用阻斷左側(cè)頸總動(dòng)脈后置于含8

3、％O2的低氧環(huán)境中2小時(shí)制備而成。干預(yù)組在HIBD后即刻給予腹腔注射依達(dá)拉奉(2mg/kg)，每日一次，連續(xù)五天，假手術(shù)組給予頸正中切口游離左側(cè)頸總動(dòng)脈，不進(jìn)行缺血缺氧。各組分別于不同時(shí)間點(diǎn)處死動(dòng)物，肉眼觀察腦組織大體形態(tài)變化，測(cè)腦組織含水量，光鏡下觀察各組大鼠左側(cè)腦組織HE染色的病理改變，并采用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)AQP-4的表達(dá)。
　　 結(jié)果：(1)缺氧缺血后新生大鼠出現(xiàn)不同程度的行為異常。(2)缺氧缺血后各時(shí)間點(diǎn)可見腦組織

4、大體有不同程度的異常改變，依達(dá)拉奉干預(yù)后上述改變減輕.(3)腦組織含水量：HIBD組6h即可出現(xiàn)腦水腫，于3d時(shí)達(dá)高峰，之后開始下降，各時(shí)間點(diǎn)與假手術(shù)組比較差異有顯著性(P＜0.01)。依達(dá)拉奉干預(yù)組含水量較HIBD組明顯下降，同一時(shí)間點(diǎn)與HIBD模型組比較差異有顯著性(P＜0.01)。(4)HE染色：假手術(shù)組腦組織結(jié)構(gòu)及細(xì)胞層次清晰，神經(jīng)元排列整齊緊密；HIBD模型組各時(shí)間點(diǎn)出現(xiàn)不同程度的神經(jīng)細(xì)胞腫脹、變性、壞死，細(xì)胞核碎裂、溶解，神

5、經(jīng)元數(shù)目減少，膠質(zhì)細(xì)胞增生。依達(dá)拉奉干預(yù)組各時(shí)間點(diǎn)損傷程度較HIBD組明顯減輕，神經(jīng)細(xì)胞存活數(shù)量多，細(xì)胞排列尚規(guī)則，僅見少量神經(jīng)細(xì)胞變性壞死。(5)免疫組織化學(xué)染色：AQP-4陽(yáng)性染色呈棕黃色的細(xì)顆粒沉積，陽(yáng)性表達(dá)主要見于室管膜、軟腦膜及血管周圍的星形膠質(zhì)細(xì)胞膜上。假手術(shù)組AQP-4呈低水平表達(dá)，各時(shí)間點(diǎn)無(wú)明顯變化；HIBD模型組各時(shí)間點(diǎn)均可見AQP-4陽(yáng)性表達(dá)，同一時(shí)間點(diǎn)與假手術(shù)組相比，AQP-4表達(dá)明顯增加，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜

6、0.01)。AQP-4在HIBD后6h即增強(qiáng)，3d達(dá)高峰，之后逐漸降低；干預(yù)組各時(shí)間點(diǎn)AQP-4表達(dá)水平較HIBD組明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。
　　 結(jié)論：(1)缺氧缺血后AQP-4表達(dá)上調(diào)，且與腦組織含水量的變化呈正相關(guān)，證實(shí)了AOP-4參與了HIBD后腦水腫的發(fā)生發(fā)展過(guò)程。(2)新生大鼠HIBD后給予依達(dá)拉奉治療可減輕腦組織的病理改變，降低腦組織含水量及AQP-4的表達(dá)，提示依達(dá)拉奉可以通過(guò)抑制AQP-4的