骨膜細(xì)胞的體外培養(yǎng)及成骨探索.pdf

1、目的：觀察體外培養(yǎng)的骨膜細(xì)胞來(lái)源的成骨細(xì)胞的形態(tài)學(xué)特征，研究骨膜細(xì)胞作為骨組織工程種子細(xì)胞的可行性；觀察成骨細(xì)胞在三維支架上構(gòu)骨情況，對(duì)骨膜細(xì)胞在骨組織工程中的應(yīng)用進(jìn)行探索。
　　 方法：常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)法行骨膜細(xì)胞體外培養(yǎng)，并進(jìn)行定向誘導(dǎo), 觀察成骨細(xì)胞形態(tài)特征及超微結(jié)構(gòu)。然后將其轉(zhuǎn)移到三維支架，體外培養(yǎng)2周形成成骨復(fù)合物；將成骨復(fù)合物植入動(dòng)物肌肉內(nèi)，過(guò)4周取出，觀察其組織結(jié)構(gòu)。
　　 結(jié)果；骨膜細(xì)胞定向誘導(dǎo)分化出的成骨細(xì)

2、胞早期呈梭形, 飽滿透明, 立體感強(qiáng); 分裂期呈立方形或短柱狀；后期由長(zhǎng)梭形逐漸變成寬梭和不規(guī)則形, 分泌功能旺盛。電鏡觀察: 胞體呈梭形, 膜面有少量微絨毛狀突起,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)豐富, 有大量異噬體等次級(jí)溶酶體, 線粒體體積較小、基質(zhì)致密有少量嵴。有原代細(xì)胞生物形態(tài)學(xué)特征。轉(zhuǎn)移至三維支架上的成骨細(xì)胞與支架孔隙貼附緊密，生長(zhǎng)良好；將三維支架植入動(dòng)物體內(nèi)生長(zhǎng)4后，細(xì)胞與支架結(jié)合緊密，生長(zhǎng)良好，有板層骨形成，部分板層骨內(nèi)可見(jiàn)類似骨髓腔樣的腔隙形