兔脂肪源性干細(xì)胞體外成骨特性的研究.pdf

1、目的：⑴分離、培養(yǎng)及鑒定兔脂肪源性干細(xì)胞(adipose-derived stem cel1s，ADSCs)；⑵探討及評(píng)估ADSCs的體外成骨特性。
　　 方法：①取3月齡新西蘭白兔頸后部皮下脂肪組織，Ⅰ型膠原酶消化獲得細(xì)胞。繪制細(xì)胞生長曲線，采用免疫細(xì)胞熒光法檢測細(xì)胞表面抗原CD44、CD45；分別加入成骨、成脂誘導(dǎo)培養(yǎng)液對(duì)所獲得細(xì)胞進(jìn)行成骨成脂誘導(dǎo)，并分別進(jìn)行形態(tài)學(xué)、堿性磷酸酶、鈣鹽沉積和油紅O染色相關(guān)檢測；②將所獲得ADS

2、Cs分為成骨誘導(dǎo)組和非成骨誘導(dǎo)組，分別于誘導(dǎo)后1W、2W、3W、4W檢測兩組的堿性磷酸酶濃度和鈣離子濃度并作統(tǒng)計(jì)分析。
　　 結(jié)果：⑴所獲細(xì)胞CD44陽性表達(dá)，CD45陰性表達(dá)；所繪制的生長曲線成典型的“S”型。⑵在成骨誘導(dǎo)條件下，堿性磷酸酶及鈣鹽沉積均呈陽性表達(dá)；在成脂誘導(dǎo)條件下，油紅O染色為陽性。⑶ALP濃度在誘導(dǎo)組與非誘導(dǎo)組之間存在組間差別，在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)誘導(dǎo)組ALP濃度均高于非誘導(dǎo)組(P＜0.05，n=5)，誘導(dǎo)組ALP濃