不同類型牛GPR54基因啟動(dòng)子變異與其表達(dá)水平的關(guān)聯(lián)性.pdf

1、本文旨在研究不同類型牛GPR54基因啟動(dòng)子的變異對(duì)GPR54基因表達(dá)水平的影響，以揭示牛GPR54基因多態(tài)性與牛早熟性之間的關(guān)聯(lián)性。試驗(yàn)提取荷斯坦牛(HT)、皖東牛(WD)及江淮水牛(JH)3種類型牛血液白細(xì)胞總RNA，通過(guò)PCR、測(cè)序、RT-PCR和雙熒光素酶報(bào)告基因的方法，檢測(cè)不同類型牛GPR54基因啟動(dòng)子區(qū)973bp區(qū)域的多態(tài)性，啟動(dòng)子效率以及GPR54基因的表達(dá)水平，分析啟動(dòng)子變異在牛品種、年齡和性別間對(duì)GPR54基因表達(dá)的效應(yīng)

2、。采用線性模型解析年齡和性別與GPR54基因表達(dá)的效應(yīng)。結(jié)果表明：
　　1.根據(jù)比較基因組學(xué)原理，比較不同類型牛群內(nèi)的多態(tài)性，皖東牛GPR54-973片段存在3個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)，檢測(cè)出3種基因型CCCCTT、AATTCC和ACTCCT，分別位于-947bp、-816bp和-754bp，荷斯坦牛中僅發(fā)現(xiàn)1種基因型，即CCCCTT，而江淮水牛除對(duì)應(yīng)位點(diǎn)的基因型為CCTTCC，其他位點(diǎn)還存在多個(gè)SNP位點(diǎn)，構(gòu)成了WD、HT和JH的不同啟動(dòng)子

3、型。
　　2.根據(jù)檢測(cè)出的啟動(dòng)子型，對(duì)3種基因型和3種牛GPR54基因啟動(dòng)子進(jìn)行雙熒光素酶檢測(cè)，結(jié)果顯示CCT基因組合啟動(dòng)效率是ATC組合的3倍，是ATC/CCT型的1.39倍（P<0.01）；3種牛啟動(dòng)子的啟動(dòng)效率存在著極顯著的差異，其中啟動(dòng)子HT效率是JH的4.44倍（P<0.01），是WD的1.99倍（P<0.01）；啟動(dòng)子WD效率是JH的2.24倍（P<0.01）。
　　3.比較荷斯坦牛、皖東牛和江淮水牛血液白細(xì)胞G