豬THRSP基因啟動子SNP及其對基因表達的影響.pdf

1、豬肉是中國消費者動物蛋白質(zhì)來源之一，豬肉品質(zhì)一直倍受人們的關注。豬肉中的脂肪及其含量是豬肉品質(zhì)和風味形成的重要決定因素，決定了豬肉的多汁性和口感。THRSP基因參與調(diào)控豬肉脂肪沉積，該基因的變異是調(diào)節(jié)脂肪合成和分解相關基因表達的關鍵因素。
　　本研究以定遠豬類群為材料，檢測獲得THRSP基因啟動子區(qū)5個SNP位點，構建了5個基因型的雙螢光素酶報告基因重組質(zhì)粒，并與pRL-CMV質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染293T細胞，利用熒光素酶檢測系統(tǒng)對轉(zhuǎn)染細胞

2、進行檢測，分析不同基因型啟動子的效率，并通過THRSP基因表達的實時熒光定量PCR和不同類型豬該基因的頻率分布驗證結果，分析啟動子SNP位點與THRSP基因表達之間的關聯(lián)性。結果表明：
　　研究所發(fā)現(xiàn)的5個突變位點分別是位于CDS上游的A-95T、G-98A、A-376G、T-400C和 C-459T，并且位于THRSP基因的啟動子區(qū)域。
　　利用5個SNP位點的聯(lián)合基因型構建雙螢光素酶報告基因重組質(zhì)粒，與pRL-CMV共轉(zhuǎn)

3、染293T細胞，檢測其轉(zhuǎn)染后的啟動子效率以TCAGA聯(lián)合型最高，TCAGA的啟動效率較CTGGA高129％，CCAGA、CTAGA和CTGAT的啟動效率較CTGGA分別低99％、73.2％和42.6％。TCAGA的啟動子效率較CCAGA高756％，CCAGA比CTAGA低96.6％。
　　分析THRSP基因的表達水平與不同啟動子效率呈顯著的相關性（P<0.05），并與瘦肉型豬群和脂肪型豬群這些SNP位點的基因頻率分布規(guī)律一致?？梢?/p>