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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:觀察肺組織水通道蛋白1(AQP1)和水通道蛋白5(AQP5)在大鼠鹽酸吸入性ALI/ARDS模型中的含量變化以及不同呼氣末正壓通氣對(duì)其影響,探討鹽酸吸入性ALI/ARDS肺水腫的發(fā)生機(jī)制以及呼吸機(jī)治療對(duì)其影響途徑。
方法:通過氣管內(nèi)吸入鹽酸(0.1 mol/L,2ml/kg)建立大鼠 ALI/ARDS模型。48只成年健康雄性SD大鼠隨機(jī)分為6組,每組8只:對(duì)照組(只行氣管切開,不注射鹽酸)、鹽酸(HCL)組(氣管內(nèi)注入鹽
2、酸)、機(jī)械通氣組(鹽酸吸入后立即行機(jī)械通氣,按呼吸末正壓分別為0cmH2O、1cmH2O、3cmH2O、5cmH2O,將該組再分為P0、P1、P3、P5四個(gè)亞組,每組8只)。呼吸機(jī)余參數(shù)設(shè)置如下:潮氣量(VT)=4ml/kg、呼吸頻率(R)=70次/分、吸呼比(I:E)=1:2、吸入氧濃度(FiO2)=21%。鹽酸吸入后6小時(shí)為實(shí)驗(yàn)終點(diǎn)。測(cè)定大鼠動(dòng)脈血氧分壓(PaO2)并計(jì)算氧合指數(shù)(PaO2/Fi02)、肺組織濕干重比(W/D);光鏡
3、下觀察肺組織病理改變,并計(jì)算肺損傷指數(shù);免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)肺組織 AQP1、5表達(dá)部位;酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測(cè)定肺組織勻漿AQP1、5含量;熒光實(shí)時(shí)定量PCR法(real-time PCR)檢測(cè)肺組織AQP1mRNA和AQP5mRNA的表達(dá);計(jì)算肺組織AQP1和AQP5含量與肺組織W/D相關(guān)性。
結(jié)果:大鼠在吸入鹽酸后很快出現(xiàn)呼吸窘迫并進(jìn)行性加重,發(fā)紺,肺組織病理見肺間質(zhì)明顯水腫,肺泡間隔增寬,肺泡腔內(nèi)有大量水腫液。
4、與對(duì)照組比較,HCL組肺組織 W/D比值(6.06±0.36 vs4.28±0.20,P=0.000)及肺損傷指數(shù)(9.63±1.60 vs1.25±0.46,P=0.000)均顯著升高,氧合指數(shù)明顯降低[(224±25)mmHg vs(416±19)mmHg,P=0.000];鹽酸組肺組織勻漿AQP1、5含量明顯低于對(duì)照組[(1.18±0.19)μg/L vs(2.08±0.34)μg/L;(531±41) ng/L vs(658±2
5、4) ng/L,均P=0.000],肺組織勻漿AQP1 mRNA和AQP5mRNA的表達(dá)也低于正常組大鼠[8.92±4.60vs15.50±3.25,P=0.008);(7.62±2.49 vs14.06±2.27,P=0.004)]。AQP1主要表達(dá)于肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞及肺泡上皮細(xì)胞,AQP5則主要表達(dá)于肺泡上皮細(xì)胞。HCL組肺組織AQP1、5的表達(dá)強(qiáng)度較對(duì)照組明顯減少。與HCL組比較,P3和P5組病理見肺水腫明顯減輕,肺損傷指數(shù)(均P
6、=0.001,0.000)及W/D(均P=0.000,0.000)均降低,肺組織勻漿AQP1、5含量(分別 P=0.002,0.000;P=0.004,0.000)和mRNA的表達(dá)(P=0.045,0.027;P=0.049,0.004)均明顯增加,以 P5組最明顯,但二者均未達(dá)到正常組水平(P<0.05)。HCL組大鼠肺組織勻漿AQP1和AQP5含量與肺組織濕干比呈顯著負(fù)相關(guān)(分別r=-0.951,P=0.000;r=-0.964,P
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