全氟化碳汽化吸入治療對(duì)肺水通道蛋白影響的研究.pdf

1、目的:通過制作海水淹溺型呼吸窘迫綜合癥(seawaterrespireatory distress syndrome，SW-RDS)動(dòng)物模型，觀察全氟化碳(perfluorocarbon，PFC)汽化吸入對(duì)SW-RDS動(dòng)物的治療作用，并從肺水通道蛋白1、5(aquaporins，AQP-1、AQP-5)的mRNA以及AQP-1蛋白水平的表達(dá)變化探討PFC汽化吸入對(duì)肺組織AQP-1、AQP-5的影響。 材料與方法: 1、動(dòng)

2、物分組與處理:選擇健康雌性新西蘭兔43只(平均體重3.00±0.18kg)，按隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分為5組:①常規(guī)通氣組(conventional mechanical ventilation，CMV組):常規(guī)機(jī)械通氣(Vt:8ml；f:40/min；FiO2:0.8；I:E 1:1)治療6小時(shí)；②呼氣末正壓組(positive end expiratory pressure，PEEP組):常規(guī)機(jī)械通氣同時(shí)，加用PEEP(8cmH20)治療

3、2小時(shí)，并于治療后繼續(xù)行常規(guī)機(jī)械通氣(參數(shù)同前)4小時(shí)；③PFC汽化吸入組(PFC組):在常規(guī)機(jī)械通氣基礎(chǔ)上，給予全氟化碳汽化吸入(7ml/kg.h)治療2小時(shí)，并于治療后繼續(xù)行常規(guī)機(jī)械通氣(參數(shù)同前)4小時(shí)；④PFC汽化吸入+呼氣末正壓組(PEEP+PFC組):在常規(guī)機(jī)械通氣基礎(chǔ)上，同時(shí)加用全氟化碳汽化吸入(6-7ml/kg.h)和PEEP(8cmH2O)治療2小時(shí)，并于治療后行常規(guī)機(jī)械通氣(參數(shù)同前)4小時(shí)；⑤對(duì)照組(Control

4、組):模型制作成功后，撤離呼吸機(jī)，不進(jìn)行任何治療。其余3只直接處死，進(jìn)行肺組織病理觀察及AQP-1免疫組織化學(xué)分析。 2、觀察SW-RDS動(dòng)物在不同機(jī)械通氣模式治療2小時(shí)期間和后續(xù)觀察4小時(shí)內(nèi)呼吸力學(xué)指標(biāo)、血液動(dòng)力學(xué)指標(biāo)、氣體交換指標(biāo)的變化；觀察光學(xué)顯微鏡下動(dòng)物肺泡、肺泡間質(zhì)的水腫以及炎性細(xì)胞浸潤(rùn)情況并進(jìn)行病理?yè)p傷評(píng)分；比較肺濕干重比變化以評(píng)價(jià)肺水腫程度。 3、從以下兩方面分析PFC汽化吸入對(duì)肺組織AQP-1及AQP-5

5、表達(dá)的影響：①應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)觀察水通道蛋白AQP-1、AQP-5 mRNA的表達(dá)；②應(yīng)用免疫組化技術(shù)觀察肺組織AQP-1蛋白水平上的變化。 結(jié)果： 1、SW-RDS模型成功后呼吸力學(xué)指標(biāo)(氣道峰壓、平臺(tái)壓、肺靜態(tài)順應(yīng)性)明顯惡化，氧合指數(shù)下降，應(yīng)用PEEP、PFC和PFC+PEEP治療后，氣體交換和呼吸力學(xué)指標(biāo)均明顯改善，肺組織損傷減輕，病理?yè)p傷評(píng)分及肺組織濕干重比降低，與CMV組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。對(duì)照組

6、動(dòng)物在脫機(jī)15分鐘內(nèi)全部死亡。 2、肺組織AQP-1、AQP-5 mRNA實(shí)時(shí)熒光定量PCR(realtime-PCR)技術(shù)定量分析表明AQP-1 mRNA相對(duì)表達(dá)量各組間按照對(duì)照組(100％)、CMV組(107.18％)、PEEP組(133.79％)、PFC組(143.40％)和PFC+PEEP(201.39％)順序遞增，但組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。AQP5 mRNA的相對(duì)表達(dá)量顯示進(jìn)行治療的CMV組(15.28％)、PEEP組(

7、17.68％)、PFC組(21.32％)及PFC+PEEP組(30.15％)較對(duì)照組(100％)顯著降低，組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 進(jìn)行治療的4組內(nèi)按CMV組、PEEP組、PFC組及PFC+PEEP組順序增加，但組間差異不顯著。免疫組化證實(shí)PFC組及PFC+PEEP組肺組織AQP-1表達(dá)較CMV組及PEEP組有增強(qiáng)的趨勢(shì)。 結(jié)論： 1、PFC汽化吸入及PEEP治療能明顯改善SW-RDS動(dòng)物的氣體交換和呼吸力學(xué)指標(biāo)，