CRP及ABCA1基因第7外顯子區(qū)R219K位點單核苷酸多態(tài)性在心房顫動中的意義.pdf

1、一、研究背景 心房顫動（房顫）是臨床上最常見心律失常，常伴有腦卒中、心力衰竭等并發(fā)癥發(fā)生，增加心血管疾病發(fā)病率和死亡率。因此在早期階段診斷和治療房顫，對預防頑固性房顫和心血管事件的發(fā)生有著重要意義。目前，我們對心房的早期病理生理變化不完全清楚，主要是由于對房顫分子生物學機制了解甚少，對房顫基因?qū)W的研究為房顫發(fā)病病因的了解提供了新的視野。少見家族性房顫主要由遺傳性分子缺陷引起電生理異常所致，然而臨床大部分房顫屬非家族性房顫，與心房

2、結(jié)構(gòu)重構(gòu)有關(guān)。隊列比較研究顯示腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)及炎癥相關(guān)基因基因單核苷酸多態(tài)性（SNP）房顫的發(fā)生有關(guān)，表明房顫形成復雜性。ABCA1基因是心血管疾病研究最常見的候選基因，它以ATP為能源，在膽固醇逆轉(zhuǎn)運（reverse cholesterol transport，RCT）和高密度脂蛋白（high density lipoprotein，HDL）生成起始步驟中起重要的作用?，F(xiàn)有研究表明ABCA1基因可能通過減少HDL-C水平

3、來增加氧化低密度脂蛋白（oxidized low-density lipoprotein，OX-LDL）和炎癥因子對血管壁的損傷，增加心血管疾病發(fā)生率，但是R219K位點SNP突變，可增加ABCA1基因的活性降低低密度脂蛋白膽固醇（low density lipoprotein cholesterol，LDL-C）水平、增加HDL-C水平的趨勢減少心血管疾病發(fā)生。越來越多的證據(jù)表明ABCA1基因SNP與冠心病、高血壓等疾病密切相關(guān)，而這

4、些疾病都是房顫發(fā)病高危因素。因此ABCA1基因也可能通過對血脂和炎癥因子的調(diào)節(jié)，對房顫的發(fā)病有所影響。 二、目的 我們研究小組對中國華南地區(qū)漢族人群205例房顫患者和205例非房顫者為研究對象，建立臨床資料，檢測CRP、血脂等血清水平，對目前可能涉及房顫發(fā)病的ABCA1基因R219K位點檢測，從而了解ABCA1基因R219K位點SNP與中國華南地區(qū)房顫人群關(guān)聯(lián)性情況；并且研究CRP、血脂與ABCA1基因R219K位點SN

5、P的關(guān)系。從而從炎癥的角度探索遺傳因素在中國華南漢族人群房顫發(fā)病可能作用。 三、方法 我們觀察房顫組和對照組兩組人群。房顫組（排除孤立性房顫和甲亢引起的房顫）205例，男116例，女89例，年齡64.50±7.98歲。對照組根據(jù)心電圖檢查排除房顫205例，與房顫組進行性別、年齡、身高、體重指數(shù)、吸煙、左室功能、瓣膜病進行配對；高血壓、冠心病、糖尿病與ABCA1基因型存在相關(guān)性，因此，這些因素的頻率在對照組和房顫組也同樣配

6、對，男116例，女89例，平均64.11±8.15歲。所有的對象均獲得知情同意，年齡50歲至70歲之間。合并感染、自身免疫性疾病、結(jié)核、腫瘤、嚴重肝腎功能不全、入選2周內(nèi)口服降脂類藥物者予以剔除。 所有入選的研究對象進行血脂、血糖、CRP等生化指標的測定。用試劑盒提取靜脈血白細胞基因組DNA。采用聚合酶鏈式反應-限制性片段長度多態(tài)性（PCR-RFLP）測定ABCA1 R219K基因的多態(tài)性，并對PCR產(chǎn)物進行測序。比較兩組之間不

7、同基因型、等位基因頻率的分布及CRP、血脂等相關(guān)指標的血清濃度的差異。 兩組均建立臨床資料觀察表，詳細記錄姓名、年齡、身高、體重、性別、吸煙、CRP、TC、TG、HDL-C、LDL-C、左房直徑、左室射血分數(shù)（LVEF）等檢查指標：以及高血壓、冠心病、糖尿病等病史。 四、結(jié)果 1.經(jīng)PCR-RFLP對ABCA1 R219K基因位點的檢測，我們發(fā)現(xiàn)中國華南地區(qū)人群存在R219K位點SNP改變。 2.PCR產(chǎn)

8、物測序證實了ABCA1存在R219K改變，經(jīng)序列分析，R219K多態(tài)為第7號外顯子ABCA1基因第1051位核苷酸發(fā)生G堿基替換呈A堿基，導致精氨酸（Arg）→賴氨酸（Lys）替代。 3.房顫組與對照組ABCA1 R219K位點RR、RK、KK基因型頻數(shù)分別為89、94、22和71、87、47，差異有統(tǒng)計學意義（X2=11.354，P=0.003）。R等位基因、K等位基因分布頻率為66.3%、33.7%和55.9%、44.1%，

9、K等位基因分布頻率在房顫組中較對照組降低，差異有統(tǒng)計學意義（X2=9.487，P=0.002）。 4.ABCA1基因R219K位點基因多態(tài)性與房顫的關(guān)系，相對RR基因型而言，RK型和KK型，均能顯著減少房顫發(fā)生的危險性，OR值（95%CI）分別為0.373（0.206～0.677）、0.433（0.242～0.777），P<0.05。但RK+KK型相對RR型而言，OR值為0.691（0.463～1.029），P>0.05。

10、 5.房顫組平均左房大小為43.76±8.06mm，對照組為41.94±7.27mm，兩組比較有統(tǒng)計學差異（P=0.017）。 6.房顫組CRP濃度明顯高于對照組（P=0.001），血脂濃度無明顯差異；R219K三種基因型間的CRP、HDL-C有統(tǒng)計學差異（P值分別為0.02、0.025）。兩兩基因型之間的比較采用LSD-t檢驗，RR基因型CRP水平高于RK、KK基因型CRP水平，存在統(tǒng)計學差異（P分別為0.011、0.037

11、），而RK基因型、KK基因型之間CRP水平差異無顯著性（P>0.05）。RR基因型HDL-C水平低于RK、KK基因型HDL-C水平，存在統(tǒng)計學差異（P分別為0.032、0.017），RK基因型、KK基因型之間HDL-C水平差異無顯著性（P>0.05）。LDL-C、TG、TC水平在三種基因型間比較無統(tǒng)計學差異（P>0.05）。 五、結(jié)論 1.ABCA1基因編碼區(qū)外顯子7中R219K SNP存在于中國華南地區(qū)漢族人群中。

12、 2.房顫患者CRP血清濃度明顯高于對照人群，存在炎性反應。 3.ABCA1 R219K K基因變異可能提高ABCA1的活性，引起HDL-C血清濃度的升高，從而降低炎性細胞因子CRP的釋放。 4.ABCA1 R219K位點SNP與中國人群房顫的發(fā)生有明顯的相關(guān)性，K等位基因可能是房顫的保護因素，R等位基因可能是房顫發(fā)病的易患因素。 5.R219K位點SNP影響房顫發(fā)生的可能機制：R等位基因降低HDL-C水平，