骨形態(tài)發(fā)生蛋白7、結(jié)締組織生長因子在原發(fā)性膜性腎病腎小球的表達變化及意義.pdf

1、目的：原發(fā)性膜性腎?。↖MN）是一種常見的慢性腎小球疾病，其形式多表現(xiàn)為蛋白尿或腎病綜合征。IMN存在自然緩解與不斷惡化兩種轉(zhuǎn)歸，有觀察蛋白尿越多預(yù)后越差，約25％-40％的IMN經(jīng)5-30年最終進展至終末期腎病（ESRD），因此IMN蛋白尿的形成原理與干預(yù)研究一直受到人們的高度重視。近年來，研究者認為足細胞蛋白的變化與腎小球濾過膜的通透性有關(guān)，因為足細胞蛋白的變化與蛋白尿水平相關(guān)。足細胞蛋白包括足細胞的固有蛋白，細胞骨架蛋白以及足細胞

2、合成分泌的功能性蛋白，但足細胞表達的各種蛋白、及其作用、以及與IMN蛋白尿的關(guān)系尚未完全闡明。
　　 骨形態(tài)發(fā)生蛋白-7（Bone Morphogenetic Protein-7，BMP-7），也稱為成骨蛋白-1（Osteogenic Protein-1，OP-1），是TGF超家族成員骨形態(tài)發(fā)生蛋白（Bone Morphogenetic Proteins，BMPs）中的一種，是一種多效性細胞因子，主要存在于人類的腎臟中，與腎臟的

3、發(fā)育、腎功能的維持密切相關(guān)，是腎臟的保護因子。但足細胞BMP-7與IMN腎小球濾過膜的形態(tài)改變、濾過功能變化、和蛋白尿之間的關(guān)系尚未研究。
　　 結(jié)締組織生長因子（Connective Tissue Growth Factor，CTGF）是一種富含半胱氨酸、分子量為36-38kD的分泌性多肽，屬即刻早期基因CCN基因家族蛋白成員之一，是TGF-β致纖維化的下游分子，廣泛存在于人體多種組織器官中，包括心、腦、腎、肺、胎盤、胰腺和結(jié)

4、締組織等，在腎臟中含量最高，也在腎小球足細胞中表達。足細胞CTGF與IMN的關(guān)系不明。
　　 本研究旨在利用免疫組化的方法重點了解BMP-7和CTGF在原發(fā)性膜性腎病腎小球內(nèi)的表達變化及其與蛋白尿、血肌酐等指標的關(guān)系，探討B(tài)MP-7和CTGF對原發(fā)性膜性腎病患者的影響。
　　 方法：（1）IMN組病例來源于2008年1月至2008年12月在河北醫(yī)科大學第二醫(yī)院腎內(nèi)科病房住院診治并經(jīng)臨床和病理確診的32例IMN患者，在依據(jù)

5、其病理分期進一步分為Ⅰ期IMN組（25例）、Ⅱ期+ⅢIMN組（其中Ⅱ期IMN6例，Ⅲ期IMN1例）兩組。（2）對照組病例來源于河北醫(yī)科大學第二醫(yī)院泌尿外科6例因腎臟腫瘤切除一側(cè)腫瘤腎后經(jīng)病理證實為腎臟良性腫瘤的患者。（3）采用免疫組織化學方法分別檢測Ⅰ期IMN組、Ⅱ期+Ⅲ期IMN組患者與對照組患者腎小球BMP-7和CTGF的表達變化（4）測定各組24小時尿蛋白定量、血肌酐的水平。（5）臨床指標及實驗數(shù)據(jù)以x±S表示，BMP-7、CTGF

6、在對照組、Ⅰ期IMN組、Ⅱ+Ⅲ期IMN組表達的關(guān)系組間采用單因素方差分析，進一步各組間兩兩比較采用SNK-q檢驗。BMP-7、CTGF分別與24h尿蛋白定量，血肌酐間的相關(guān)性采用直線相關(guān)分析。（6）采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件處理數(shù)據(jù)，以p<0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。
　　 結(jié)果：1、臨床實驗指標：
　　 1.132例IMN患者，平均年齡（47.74±11.64）歲，與正常對照組患者平均年齡（50.60±10.12）

7、歲比較，在年齡構(gòu)成上無統(tǒng)計學差異（p>0.05）。
　　 1.2正常對照組患者的24小時尿蛋白定量、血肌酐分別為：（0.05±0.03）g/24h、（63.74±8.95）μmol/L；Ⅰ期IMN組、Ⅱ+Ⅲ期IMN組、Ⅰ-Ⅲ期IMN組24小時尿蛋白定量分別為：（4.29±2.23）g/24h、（5.12±2.16）g/24h、（4.56±2.26）g/24h；Ⅰ期IMN組、Ⅱ+Ⅲ期IMN組、Ⅰ-Ⅲ期IMN組血肌酐分別為：（72.

8、02±11.87）μmol/L、（76.30±6.50）μmol/L、（72.85±11.08）μmol/L。IMN組24小時尿蛋白定量明顯高于對照組（p<0.01）。
　　 2、免疫組織化學結(jié)果：
　　 2.1 BMP-7在對照組、IMN組腎小球足細胞、近曲小管、集合小管均有表達；在IMN組、Ⅰ期IMN組、Ⅱ+Ⅲ期IMN組及對照組腎小球表達的陽性面積比值分別為：（18.46±8.25）％、（25.98±3.93）％、（

9、12.56±4.89）％、（30.15±4.19）％。 BMP-7在IMN組、Ⅰ期IMN組、Ⅱ+Ⅲ期IMN組腎小球內(nèi)的表達均較對照組顯著減少（p<0.01，p<0.05，p<0.01）；BMP-7在Ⅱ+Ⅲ期IMN組腎小球內(nèi)的表達較Ⅰ期IMN組顯著減弱（p<0.01）。
　　 2.2 CTGF在對照組、IMN組腎小球足細胞、內(nèi)皮細胞、系膜細胞及腎小管上皮細胞均有表達；在IMN組、Ⅰ期IMN組、Ⅱ+Ⅲ期IMN組及對照組腎小球表達的陽

10、性面積比值分別為：（26.57±10.56）％、（20.49±6.78）％、（32.49±8.75）％、（15.10±3.30）％。 CTGF在IMN組、Ⅰ期IMN組、Ⅱ+Ⅲ期IMN組腎小球內(nèi)的表達均較對照組明顯增加（p均<0.01）；CTGF在Ⅱ+Ⅲ期IMN組腎小球內(nèi)的表達較Ⅰ期IMN組顯著增加（p<0.01）。
　　 2.3 IMN組腎小球內(nèi)BMP-7的表達與CTGF的表達呈負相關(guān)關(guān)系（r=-0.698，p=0.001）。<

11、br>　　 2.4 IMN組腎小球內(nèi)BMP-7的表達與24小時尿蛋白定量呈負相關(guān)關(guān)系（r=-0.751，p=0.001），而與血白蛋白、血肌酐、血脂、免疫球蛋白IgG及血尿酸無明顯相關(guān)性。
　　 2.5 IMN組腎小球內(nèi)CTGF的表達與24小時尿蛋白定量呈正相關(guān)關(guān)系（r=0.605，p=0.001），與血白蛋白、血肌酐、血脂、免疫球蛋白IgG及血尿酸無明顯相關(guān)性。
　　 結(jié)論：1腎小球內(nèi)BMP-7主要表達于足細胞。BM

12、P-7在各IMN組腎小球內(nèi)的表達均較正常對照組顯著減少，且BMP-7在IMN組腎小球內(nèi)的表達與24小時尿蛋白定量呈負相關(guān)關(guān)系，即隨著IMN的病理類型加重，BMP-7在腎小球中的表達逐步減少，尿蛋白逐步增加，提示BMP-7是腎臟的保護因子。2腎小球內(nèi)CTGF非特異性地表達于足細胞。CTGF在IMN組腎小球內(nèi)的表達較正常對照組顯著增加，且CTGF在IMN組腎小球內(nèi)的表達與24小時尿蛋白定量呈正相關(guān)關(guān)系。提示IMN腎小球內(nèi)CTGF的表達增加與