骨形態(tài)發(fā)生蛋白（BMPs）基因mRNA在牛不同組織中表達(dá)的研究.pdf

1、骨形態(tài)發(fā)生蛋白(BMPs)是TGF-β超家族的重要成員之一，BMPs對(duì)雌性繁殖性能有重要作用，特別是對(duì)卵巢的作用尤為顯著，能夠調(diào)控顆粒細(xì)胞增殖和細(xì)胞分化，也對(duì)卵母細(xì)胞發(fā)育有作用。故對(duì)BMPs及其受體結(jié)構(gòu)的分子克隆及在不同組織表達(dá)的分析，來(lái)確定BMPs及其受體在牛不同組織所起的作用，進(jìn)而對(duì)從基因角度研究不孕或多胎的機(jī)制具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。 本試驗(yàn)應(yīng)用RT-PCR方法從蒙古牛卵巢組織中擴(kuò)增獲得BMP-15、GDF-9、BMPR-IB

2、和BMP-4的部分基因序列；并通過(guò)半定量RT-PCR分析了BMP-15、GDF-9、BMPR-IB和BMP-4基因mRNA在蒙古牛不同組織中的表達(dá)情況。方法：(1)在Genbank中查找人、小鼠和羊的BMP-15、GDF-9、BMPR-IB和BMP-4基因序列設(shè)計(jì)引物；提取牛卵巢總RNA，分別采用RT-PCR技術(shù)擴(kuò)增牛BMP-15、GDF-9、BMPR-IB和BMP-4的部分序列，將此片段重組到PMD18-T載體中，雙酶切和PCR鑒定后

3、測(cè)序。結(jié)果證實(shí)，所克隆的序列分別為牛BMP-15、GDF-9、BMPR-IB和BMP-4部分eDNA序列。(2)以β-actin為內(nèi)參照物，應(yīng)用RT-PCR方法檢測(cè)BMPs在牛不同組織中可能的表達(dá)。結(jié)果顯示，BMP-15、GDF-9、BMPR-IB和BMP-4基因mRNA均在卵巢、輸卵管、子宮和腎臟組織中表達(dá)。凝膠電泳條帶灰度分析的結(jié)果顯示：牛BMP-15基因在卵巢和輸卵管中高度表達(dá)；牛GDF-9基因在卵巢中高度表達(dá)，而在輸卵管、子宮和