NRTN和NGF聯(lián)合應(yīng)用治療阿爾茨海默病模型鼠的研究.pdf

1、阿爾茨海默病(AD)是一種以認(rèn)知功能障礙和學(xué)習(xí)記憶能力損害為主的中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)退行性疾病，并伴有不同程度的語言、運(yùn)動、及人格方面的異常。AD發(fā)病率隨年齡的增大而增高。目前，我國正步入老齡社會，老年人口不斷增多，AD患者大幅度增加，給患者、家人及社會帶來巨大的痛苦和負(fù)擔(dān)。因此，尋找有效的治療措施已成為當(dāng)代醫(yī)學(xué)界的迫切課題。 AD的主要病理改變是海馬和皮質(zhì)等處出現(xiàn)大量的老年斑(SP)、神經(jīng)纖維纏結(jié)(NFT)、神經(jīng)元的潰變，其

2、中以基底前腦膽堿能神經(jīng)元丟失最為嚴(yán)重，同時(shí)也伴有γ-氨基丁酸(GABA)能、去甲腎上腺素能、5-羥色胺(5-HT)能神經(jīng)元丟失。 由于AD病因及發(fā)病機(jī)制尚不清楚，有關(guān)AD的治療一直有待于解決。因此，基礎(chǔ)和臨床的科學(xué)家們在這方面進(jìn)行大量的探索，提出了許多的治療策略：一般治療(主要有腦血液循環(huán)促進(jìn)劑、腦細(xì)胞代謝激活劑)、神經(jīng)遞質(zhì)的替代治療(使用某些藥物，致使腦內(nèi)相應(yīng)的遞質(zhì)濃度升高)、神經(jīng)細(xì)胞替代療法(移植療法)、病理干預(yù)治療(如抗炎

3、和抗氧化物等)、基因治療(主要采用基因修飾法)、神經(jīng)營養(yǎng)因子(NTF)治療等。研究表明，有些藥物能緩解AD患者的部分癥狀，有些藥物根本無效，而且大部分藥物會產(chǎn)生嚴(yán)重的副作用。腦移植對AD模型鼠的學(xué)習(xí)記憶能力有一定的改善作用，但臨床供體問題難以解決。神經(jīng)營養(yǎng)因子是靶細(xì)胞分泌的特異性蛋白分子，有促進(jìn)和維持神經(jīng)細(xì)胞生長、存活、分化、和執(zhí)行功能的作用，它對神經(jīng)元有一定的特異性。神經(jīng)生長因子(NGF)是其中發(fā)現(xiàn)最早、研究最為深入的一個(gè)營養(yǎng)因子，它

4、可防止基底前腦膽堿能神經(jīng)元漬變，改善認(rèn)知及學(xué)習(xí)記憶能力，而NGF對非膽堿能神經(jīng)元無營養(yǎng)作用。NRTN是一個(gè)新發(fā)現(xiàn)的廣譜神經(jīng)營養(yǎng)因子，它對多種神經(jīng)元都具有明顯的神經(jīng)營養(yǎng)和保護(hù)作用，如對DA神經(jīng)元、運(yùn)動神經(jīng)元、頸上神經(jīng)節(jié)交感神經(jīng)元等非膽堿能神經(jīng)元有營養(yǎng)作用。為此，本實(shí)驗(yàn)提出治療策略：用能營養(yǎng)非膽堿能神經(jīng)元神經(jīng)營養(yǎng)因子NRTN和NGF‘聯(lián)合應(yīng)用，利用它們對不同神經(jīng)元的營養(yǎng)保護(hù)作用，協(xié)同地促進(jìn)腦內(nèi)多個(gè)損傷的神經(jīng)遞質(zhì)系統(tǒng)存活和功能的恢復(fù)，既更好地

5、改善AD病理生理狀況和學(xué)習(xí)記憶能力，又明顯減少用量，為臨床神經(jīng)營養(yǎng)因子聯(lián)合應(yīng)用提供理論依據(jù)。 材料和方法: 雄性SD大鼠(250-300g)，單側(cè)切斷穹隆海馬傘(FF)，以制備隔-海馬通路損傷的AD模型。動物-共分4組：①正常對照組(正常組)；②FF損傷組(損傷組)；③FF損傷+NGF治療組(NGF組)；④FF損傷+NGF和NRTN聯(lián)合治療組(聯(lián)合組)。大鼠切斷FF，然后在傷側(cè)側(cè)腦室注射營養(yǎng)因子，NGF組給β-NGF，0

6、.3μg/只/次；聯(lián)合組給β-NGF和NRTN，各0.3μg/只/次；對照組給等體積的人工腦脊液(ACSF)，3天給藥一次，共給藥一個(gè)月。然后對各組動物進(jìn)行Y-迷宮空間學(xué)習(xí)記憶能力的檢測。行為檢測后將動物處死，取腦，冰凍切片，進(jìn)行突觸素(SYH)、膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)免疫組化染色。對大鼠腦海馬區(qū)星形膠質(zhì)細(xì)胞(AST)和SYH進(jìn)行計(jì)數(shù)和形態(tài)學(xué)參數(shù)的測定，并對實(shí)驗(yàn)大鼠的空間學(xué)習(xí)記憶能力進(jìn)行檢測。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)

7、處理。 結(jié)論: 1、穹窿海馬傘損傷引起海馬結(jié)構(gòu)的突觸丟失而造成的SYH減少，是引起AD模型鼠空間學(xué)習(xí)記憶障礙的神經(jīng)基礎(chǔ)。 2、NRq、N和NGF聯(lián)用與NGF單獨(dú)應(yīng)用治療對AD模型鼠海馬突觸重建有不同程度促進(jìn)作用，聯(lián)合組效果要較NGF組好。 3、穹窿海馬傘損傷引起海馬結(jié)構(gòu)的AST增生肥大，其改變與AD模型大鼠的空間學(xué)習(xí)記憶障礙密切相關(guān)。 4、NRTN和NGF聯(lián)用與NGF單獨(dú)應(yīng)用治療能不同程度地抑制穹窿海馬傘