治療阿爾茨海默病的多肽的藥效學(xué)研究.pdf

1、阿爾茨海默病(Alzheimer’sdisease,AD)是一種以老年人記憶和認(rèn)知功能損傷為臨床表征的神經(jīng)退行性疾病。AD是老年癡呆疾病中最常見(jiàn)的形式,病理特征包括A?聚集形成的老年斑(senileplaques,SP)、Tau蛋白異常磷酸化形成的神經(jīng)纖維纏結(jié)(neurofibrillarytangles,NFT)、神經(jīng)元丟失導(dǎo)致的腦萎縮、膠質(zhì)增生以及炎癥。在AD的發(fā)病過(guò)程中,Aβ扮演著重要的角色。Aβ是新陳代謝的自然產(chǎn)物,由39-42

2、個(gè)氨基酸組成,由β-分泌酶(BACE1)和γ-分泌酶水解加工淀粉樣前體蛋白(APP)產(chǎn)生。大量的研究表明,Aβ的聚集在AD的發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮關(guān)鍵性作用。Aβ單體聚集形成的可溶性的寡聚體是引發(fā)神經(jīng)細(xì)胞毒性的主要原因,而氧化應(yīng)激與炎癥反應(yīng)是其誘發(fā)細(xì)胞毒性的主要機(jī)制。
　　到目前為止,盡管不能確定AD的發(fā)生是否伴隨氧化應(yīng)激反應(yīng),但是,氧化應(yīng)激反應(yīng)在AD的病程進(jìn)展中發(fā)揮著重要的作用。氧化應(yīng)激過(guò)程中Aβ聚集物能夠誘導(dǎo)活性氧(Reactiveo

3、xygenspecies,ROS)的過(guò)度產(chǎn)生。產(chǎn)生的ROS可能損傷包括蛋白、脂質(zhì)以及DNA在內(nèi)的多種類(lèi)型的生物大分子。雖然脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)產(chǎn)生的丙二醛(MDA)具有神經(jīng)毒性,尤其是可能導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性,影響蛋白質(zhì)功能,但是脂質(zhì)過(guò)氧化本身可以通過(guò)直接損傷細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)的完整性導(dǎo)致細(xì)胞凋亡甚至死亡。另一方面,據(jù)報(bào)道,在AD病人的腦中,對(duì)ROS具有解毒作用的內(nèi)源性的抗氧化物酶的水平降低。其中超氧化物歧化酶(SOD)與谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)

4、是最主要的抗氧化物酶,能夠抵抗自由基誘導(dǎo)的氧化性損傷,發(fā)揮細(xì)胞保護(hù)作用。此外,Aβ聚集物能夠激活小膠質(zhì)細(xì)胞,促進(jìn)前炎癥細(xì)胞因子諸如腫瘤壞死因子α(TNF-α)和白介素1β(IL-1β)的釋放,進(jìn)而促進(jìn)下游炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)的發(fā)生。因此,在AD的修飾型藥物研發(fā)過(guò)程中,降低Aβ42聚集引起的神經(jīng)毒性、抑制Aβ42誘導(dǎo)產(chǎn)生的氧化應(yīng)激以及前炎癥細(xì)胞因子的釋放成為治療與預(yù)防AD的可行性計(jì)策。
　　在先前的研究工作中,實(shí)驗(yàn)室以Aβ單體為靶分子,利用

5、噬菌體展示技術(shù),從環(huán)型七肽庫(kù)中經(jīng)過(guò)三輪篩選、富集、洗脫得到了能夠特異性與Aβ結(jié)合的多肽,并命名為XD3。本文在原來(lái)研究的基礎(chǔ)上,對(duì)XD3在體內(nèi)以及體外水平的藥效學(xué)進(jìn)行了研究。
　　在細(xì)胞水平研究結(jié)果表明,多肽XD3能夠抑制Aβ42誘導(dǎo)產(chǎn)生的神經(jīng)細(xì)胞毒性;通過(guò)減少活性氧(ROS)以及氧化型谷胱甘肽(GSSG)的生成,增加還原型谷胱甘肽GSH的含量,增強(qiáng)SOD、GSH-Px的活性降低Aβ42誘導(dǎo)產(chǎn)生的氧化應(yīng)激反應(yīng);此外,XD3可以下調(diào)