不同種石莼原生質(zhì)體分離和再生及電穿孔技術(shù)轉(zhuǎn)入DNA研究.pdf

1、本論文主要研究從不同種的石莼中獲得大量有效原生質(zhì)體并利用電穿孔轉(zhuǎn)入外源DNA的方法。通過(guò)不同的抗生素和去污劑的組合處理Ulvapertusa(變異種和野生種)，Ulvafasciata，Ulvamakishima得到無(wú)污染的植株。利用不同的酶的組合得到有細(xì)胞活力的原生質(zhì)體，最終找到一種最有效的酶組合。進(jìn)一步研究原生質(zhì)再生的最佳條件，并觀察不同的生長(zhǎng)條件和培養(yǎng)液對(duì)生長(zhǎng)形式的影響。而且還觀察到石莼在同一種再生條件下表現(xiàn)出兩種不同的生長(zhǎng)形式

2、，一種是原生質(zhì)體進(jìn)行重復(fù)的細(xì)胞分裂形成單細(xì)胞植株，另一種是原生質(zhì)體經(jīng)過(guò)細(xì)胞壁的再生，轉(zhuǎn)變成生殖細(xì)胞放出能動(dòng)的孢子，萌發(fā)成配偶體。石莼原生質(zhì)體再生在培養(yǎng)液中不需要滲透劑。甘露醇在細(xì)胞壁再生的初期沒(méi)有影響，然而在培養(yǎng)液中高濃度的甘露醇會(huì)阻止進(jìn)一步的生長(zhǎng)。又進(jìn)一步研究了利用電穿孔的技術(shù)轉(zhuǎn)入外源DNA，獲得大量能存活的轉(zhuǎn)入DNA的細(xì)胞，這項(xiàng)技術(shù)可以提高或增添石莼本身不具備的某些優(yōu)良性狀。在我們這次研究中通過(guò)這種技術(shù)處理提高石莼殺死赤潮生物的能力