拮抗性芽孢桿菌F53抑制茄子黃萎病菌（Verticillium dahliae）的研究.pdf

1、本研究利用離體抑菌圈法從茄子病健植株根際土壤篩選出對黃萎病原菌(Verticilliumdahliae)抑菌效果明顯的芽孢桿菌F53菌株，對該菌株進(jìn)行發(fā)酵條件優(yōu)化試驗，初步探討其發(fā)酵液的穩(wěn)定性、發(fā)酵液中抑菌活性物質(zhì)的性質(zhì)，對黃萎病原菌的抑菌機(jī)理及溫室人工接種黃萎病原菌的茄子幼苗盆栽試驗，同時，通過生理生化試驗及16SrDNA序列分析對菌株進(jìn)行鑒定。 在菌種篩選過程中，發(fā)現(xiàn)F53菌株具有較強(qiáng)的平板抑菌能力，固體培養(yǎng)條件下能夠分泌幾

2、丁質(zhì)酶及β-1，3-葡聚糖酶。抑菌譜試驗表明，該菌株抑菌范圍較廣，能夠?qū)Χ喾N所用指示菌株產(chǎn)生較明顯的抑制生長作用。 為了獲得F53菌株的最佳發(fā)酵條件，通過碳、氮源正交試驗及培養(yǎng)條件的優(yōu)化，得出最佳培養(yǎng)基配方為(％)：蔗糖0.3，玉米淀粉0.3，蛋白胨1.0，豆餅粉0.3，NaCl0.5，F(xiàn)eSO40.002，MgSO40.04；最佳培養(yǎng)條件為：培養(yǎng)基起始pH值7.0～8.0、250mL三角瓶裝液量50mL、搖瓶速度150r/mi

3、n、接種量4％、溫度34℃，培養(yǎng)時間48h，這為該菌株的發(fā)酵罐放大試驗提供了理論性依據(jù)。 發(fā)酵液穩(wěn)定性試驗結(jié)果表明，該菌株發(fā)酵液熱、酸堿、蛋白酶及貯藏的穩(wěn)定性均較好，發(fā)酵液經(jīng)100℃處理100min，在pH3.0～10.0的條件下放置48h，蛋白酶K及胰蛋白酶處理一定時間，4℃冰箱中保存6個月，其抑菌活性基本不變。 發(fā)酵液分別用10％～100％飽和度(NH4)2SO4鹽析，(NH4)2SO4飽和度為70％時，所沉淀出來的