萎縮芽孢桿菌SF1拮抗蛋白質(zhì)的研究.pdf

1、胡麻枯萎病是由尖孢鐮刀菌胡麻專(zhuān)化型引起的一種嚴(yán)重的真菌性病害。本實(shí)驗(yàn)室篩選獲得一株萎縮芽孢桿菌SF1，能抑制尖孢鐮刀菌胡麻專(zhuān)化型菌株的生長(zhǎng)。前期試驗(yàn)采用非接觸平板培養(yǎng)法測(cè)定胞外揮發(fā)性物質(zhì)具有抑菌作用;采用蛋白酶處理發(fā)酵證明胞外蛋白具有較好的抑菌活性。本論文將在此基礎(chǔ)上對(duì)菌株SF1的有效拮抗蛋白質(zhì)進(jìn)行進(jìn)一步研究。
　　本研究首先采用體外平板實(shí)驗(yàn)，觀(guān)察確定菌株SF1分泌的胞外物質(zhì)可以抑制病原菌菌落的生長(zhǎng)，抑菌率為48.18％，并且能有

2、效抑制病原菌菌絲的生長(zhǎng)和孢子萌發(fā)，導(dǎo)致病原菌菌絲及孢子形態(tài)畸形。其次，運(yùn)用蛋白質(zhì)雙向電泳技術(shù)對(duì)生防菌SF1和標(biāo)準(zhǔn)菌株萎縮芽孢桿菌CGMCC1.3383的胞外蛋白質(zhì)進(jìn)行了蛋白質(zhì)組學(xué)水平的差異比較分析，共找到154個(gè)差異點(diǎn)，對(duì)其中33個(gè)差異極顯著的上調(diào)蛋白進(jìn)行質(zhì)譜鑒定，成功鑒定出14種蛋白質(zhì):Thioredoxin-like proteinykuU(類(lèi)硫氧還蛋白ykuU)、2，3-bisphosphoglycerate-independen

3、t phosphoglyceratemutase（2，3-二磷酸甘油酸非依賴(lài)型磷酸甘油酸變位酶）、Dihydrolipoyldehydrogenase（二氫硫辛酸脫氫酶）、Inosine-5'-monophosphate dehydrogenase（次黃嘌呤單核苷酸脫氫酶）、(3R)-hydroxymyristoyl-[acyl-carrier-protein]dehydratase（β-羥脂酰ACP脫水酶）、Bifunctional

4、protein GlmU(雙功能蛋白GlmU)、Putative aminopeptidaseytoP（推定的氨基肽酶ytoP）、Probable4-aminobutyrate aminotransferase（可能的4-氨基丁酸轉(zhuǎn)氨酶）、PutativeaminopeptidaseyhfE（推定的氨基肽酶yhfE）、Pyrrolidone-carboxylate peptidase（吡咯烷磷酸肽酶）、Beta-glucanase（β-