丹參及甘草組織培養(yǎng)的研究.pdf

1、本文對(duì)丹參和甘草的組織培養(yǎng)進(jìn)行了初步研究。 1.丹參方面：以丹參的葉片為外植體，誘導(dǎo)出愈傷組織；再?gòu)挠鷤M織上誘導(dǎo)出不定根。在此基礎(chǔ)上，建立了丹參酮ⅡA和原兒茶醛的高效液相測(cè)定方法，并對(duì)影響丹參不定根組織培養(yǎng)的一些因素進(jìn)行了探討。結(jié)果如下： (1)確定了丹參不定根的誘導(dǎo)和繼代培養(yǎng)基，為含有3％蔗糖、吲哚丁酸(IBA)2mg·L-1、激動(dòng)素(KT)0.2mg·L-1的MS培養(yǎng)基。 (2)蔗糖濃度為60g·L-1時(shí)，

2、丹參不定根的增殖倍數(shù)最高，為8.0；蔗糖濃度為20g·L-1時(shí)，丹參不定根中丹參酮ⅡA的含量最高，為0.012mg·g-1；蔗糖濃度為30g·L-1時(shí)，原兒茶醛的含量最高，為0.22mg·g-1。 (3)培養(yǎng)基的初始pH值為6.5時(shí)，丹參不定根的生長(zhǎng)情況最好，其增殖倍數(shù)為5.1；初始pH值為5.5和6.0時(shí)，丹參不定根中丹參酮ⅡA的含量最高，為0.033mg·g-1；初始pH值為5.8時(shí)，其原兒茶醛的含量最高，為0.22mg·g

3、-1。 (4)當(dāng)接種量為2.5％時(shí)，丹參不定根的生長(zhǎng)情況最好，增殖倍數(shù)為4.0。 (5)培養(yǎng)基中IBA的濃度為2mg·L-1時(shí)，丹參的增殖倍數(shù)最高，為4.17；IBA的濃度為2mg·L-1、KT濃度為1mg·L-1時(shí)，丹參酮ⅡA的含量最高，為0.19mg·L-1；IBA的濃度為0mg·L-1、KT濃度為0.5mg·L-1時(shí)，原兒茶醛的含量最高，為0.34mg·g-1。 (6)當(dāng)NH4+和NO3-總濃度為60mM·

4、L-1時(shí)：NH4+/NO3-為1：4時(shí)，不定根的增殖倍數(shù)最高，為5.38；NH4+/O3-為0時(shí)，丹參酮ⅡA和原兒茶醛的含量最高，分別為0.037mg·g-1和0.34mg·g-1。 (7)超聲處理對(duì)丹參不定根的生長(zhǎng)和其次生代謝都有影響。在150W下處理3min時(shí)，增殖倍數(shù)最大，為2.01;在300W下處理3min時(shí)，其丹參酮ⅡA的含量最高，為0.67mg·g-1，是對(duì)照組的20多倍；在500W下處理3min時(shí)，其原兒茶醛的含量