水稻抗病相關(guān)基因OsDR8的分離克隆和功能鑒定.pdf

1、植物病害是影響農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的重要因素之一，每年由于植物病害導(dǎo)致農(nóng)作物大幅度的減產(chǎn)，嚴(yán)重影響人們生活水平的提高。研究植物與病原物的相互作用以及植物在病原物侵染后的生理生化變化是分析植物抗病機(jī)理的重要途徑。為了研究植物的抗病反應(yīng)，常用的方式有抗病基因的克隆、抗病防衛(wèi)反應(yīng)基因的分離與鑒定，寄主與病原物的識(shí)別以及信號(hào)的傳導(dǎo)和防衛(wèi)反應(yīng)的誘導(dǎo)等。通過(guò)對(duì)大量抗病防衛(wèi)反應(yīng)基因以及參與抗病信號(hào)傳遞與識(shí)別的基因的分離和功能鑒定，為研究植物抗病反應(yīng)機(jī)理并為最終解

2、釋病原物侵染機(jī)制提供了新途徑。 利用能大規(guī)模研究基因表達(dá)的cDNA點(diǎn)陣技術(shù)，通過(guò)對(duì)白葉枯病、稻瘟病具有抗性的水稻材料在病原接種前后基因表達(dá)差異的研究來(lái)發(fā)現(xiàn)抗病基因，獲得了大量與抗病相關(guān)的cDNA克隆，其中來(lái)自秈稻明恢63的cDNA克隆E13513，在接種稻瘟病菌或白葉枯病菌后在所有抗病水稻材料中的表達(dá)量都增加了，表明該cDNA克隆所對(duì)應(yīng)的基因是一個(gè)抗病相關(guān)基因，命名為OsDR8。 本課題研究了水稻抗病相關(guān)基因OsDR8的

3、功能，通過(guò)雙鏈RNA干涉技術(shù)對(duì)該基因的沉默引起了植物一系列的表型變化，OsDR8基因表達(dá)量減少的轉(zhuǎn)基因植株均表現(xiàn)出了對(duì)白葉枯病PX061及稻瘟病V86013抗性的減弱。OsDR8基因的編碼產(chǎn)物是與玉米中維生素B1合成酶高度同源。通過(guò)對(duì)TO代轉(zhuǎn)基因植株定量RT—PCR分析顯示OsDR8基因比對(duì)照植株具有更低水平的表達(dá)量，而其葉片當(dāng)中維生素B1的含量也相應(yīng)比對(duì)照植株明恢63要低。同時(shí)本實(shí)驗(yàn)鑒定了另外兩種病程相關(guān)蛋白基因的表達(dá)量也相應(yīng)減少了。