水稻抗病性相關(guān)homeodomain型轉(zhuǎn)錄因子基因OsBIHD1的克隆鑒定與功能分析.pdf

1、該實(shí)驗(yàn)室的前期的研究中,證明苯并噻二唑(benzothiadiazole,BTH)能誘導(dǎo)水稻對稻瘟病、白葉枯病和紋枯病等病害的抗病性,并運(yùn)用抑制性差減雜交法鑒定了200多個與水稻抗病反應(yīng)相關(guān)的差異表達(dá)cDNA克隆,其中的一個克隆HIHN-w5可能含有編碼homeodomain蛋白轉(zhuǎn)錄因子的基因片段.在此基礎(chǔ)上,該研究克隆鑒定了水稻中與苯并噻二唑誘導(dǎo)抗病性相關(guān)的編碼homeodomain型BELL轉(zhuǎn)錄因子基因OsBIHD1(GenBank

2、登錄號:AY524972),并對其功能做了進(jìn)一步的分析.在水稻抗病反應(yīng)相關(guān)的差異表達(dá)的cDNA中,克隆HIHN-w5含有733 bp的插入片段,通過在GenBank數(shù)據(jù)庫中的序列相似性搜索發(fā)現(xiàn),該插入片段與Arabidopsis thaliana中homedomain型轉(zhuǎn)錄因子BELL1和番茄中homedomain型轉(zhuǎn)錄因子BELL30基因具有高度的相似性.運(yùn)用改良的快速擴(kuò)增cDNA末端(rapidamplification of cD

3、NA ends,RACE)技術(shù),以水稻cDNA文庫噬菌體DNA為模板,擴(kuò)增出5'-末端的缺失序列并以此為基礎(chǔ)獲得基因全長,命名為OsBIHD1.為了研究OsBIHD1基因在水稻抗病性中的作用,我們對OsBIHD1基因在水稻誘導(dǎo)抗病性以及在水稻—稻瘟病菌(Magnaporthe grisea)親和與非親和互作中的表達(dá)模式進(jìn)行了分析.為了進(jìn)一步明確水稻OsBIHD1基因在抗病性中的作用,我們利用外源花椰菜花葉病毒組成型強(qiáng)表達(dá)啟動子CaMV3