Mn-SOD基因轉(zhuǎn)化獼猴桃（Actinidia deliciosa）的研究.pdf

1、中國是獼猴桃的起源和分布中心,資源極其非富.獼猴桃果實風(fēng)味獨特,富含維生素C、糖、多種人體必需氨基酸及其他營養(yǎng)成分,有"果中之王"的美稱.植物的生長發(fā)育總是處于環(huán)境脅迫之中,它們嚴重影響著作物的產(chǎn)量.研究表明,提高植物體內(nèi)Mn-SOD活性是增強植物抗逆性的有效途徑之一.該試驗通過根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)將Mn-SOD基因?qū)朊牢东J猴桃,獲得轉(zhuǎn)化完整植株,選育具有高抗逆性的獼猴桃新品種.以美味獼猴桃優(yōu)良品種海沃德和秦美組培苗為試材,以基本培養(yǎng)基、碳

2、源、6-BA和生長素為試驗因子,通過L<,9>(3<'4>)正交試驗,篩選出秦美離體葉片再生的理想培養(yǎng)基,即MS+6-BA4.0mg/L+NAA1.0mg/L+蔗糖30g/L.通過比較TDZ、ZT、6-BA和IBA對海沃德葉片再生的影響,獲得海沃德最適培養(yǎng)基為MS+TDZ1.0mg/L+IBA0.15mg/L,再生頻率為82.2%,再生芽數(shù)為4.75.同時,研究了接種方式、AgNO<,3>等因素對離體葉片再生效率的影響,進一步優(yōu)化了葉片

3、再生體系,從而建立了穩(wěn)定高效的獼猴桃葉片再生體系.另外,以葉片再生不定芽為試材,進行了基本培養(yǎng)基和不同激素組合對獼猴桃增殖和生根的研究.在建立美味獼猴桃葉片再生體系的基礎(chǔ)上,研究了Mn-SOD基因轉(zhuǎn)化中影響葉片轉(zhuǎn)化效率的多種因素,包括葉片預(yù)培養(yǎng)、Kan濃度、抑菌素濃度、浸染菌液以及Vir基因誘導(dǎo)因子等,從而確立了美味獼猴桃遺傳轉(zhuǎn)化體系.選取幼嫩葉平鋪在分化培養(yǎng)基中預(yù)培養(yǎng)20d,然后剪成0.5cm<'2>大小的葉塊作為轉(zhuǎn)化受體,用攜帶目的