獼猴桃雄性基因RAPD標(biāo)記的研究.pdf

1、　　本研究以美味獼猴桃20個(gè)品種(株系)、中華獼猴桃15個(gè)品種(株系)及美味獼猴桃海瓦德×秦雄201人工控制雜交群體14個(gè)單株共計(jì)49份材料為試材，首先以親本海瓦德和秦雄201的DNA為模板，對(duì)隨機(jī)引物進(jìn)行篩選，然后以F1代6個(gè)植株的DNA等量混合的雌性DNA樣與雄性DNA樣為模板，對(duì)引物進(jìn)一步篩選，最后用雜交組合F1代個(gè)體DNA為模板，獲得了與獼猴桃雄性基因連鎖的RAPD標(biāo)記S1032850和S79750，并對(duì)所得標(biāo)記的有效性在中華獼

2、猴桃和美味獼猴桃上進(jìn)行了驗(yàn)證。同時(shí)對(duì)獲得的與獼猴桃雄性基因連鎖的RAPD標(biāo)記S1032850進(jìn)行了測(cè)序及序列相似性分析。取得的主要結(jié)果如下：　　1.通過對(duì)300個(gè)隨機(jī)引物的篩選和研究，得到了與獼猴桃雄性基因連鎖的RAPD標(biāo)記S1032850和S79750。在中華獼猴桃、美味獼猴桃雌雄個(gè)體上進(jìn)一步驗(yàn)證發(fā)現(xiàn)：標(biāo)記S1032850存在于研究所用的22株雄株中，在27株雌性個(gè)體中只有4株存在標(biāo)記片段S1032850;標(biāo)記S79750在22株雄

3、株中有19株存在(在F1代6株雄株有5株存在)，在27株雌性個(gè)體中有13株存在標(biāo)記片段S79750(在F，代6株雌株有1株存在)。表明獼猴桃雄性基因連鎖的標(biāo)記S1032850與實(shí)際符合率高于標(biāo)記S79750。　　2.從美味獼猴桃“秦雄201”親本和中華獼猴桃“江西78-1”中分別回收了特異標(biāo)記S1032850的DNA片段，對(duì)它們進(jìn)行了克隆、測(cè)序，獲得了S1032850標(biāo)記的核苷酸序列，其由867bp的特定堿基序列組成。將來自于中華獼猴

4、桃雄性標(biāo)記S1032850的特定堿基序列片段登陸Genbank，其登陸號(hào)為AY336259。為進(jìn)一步將RAPD標(biāo)記轉(zhuǎn)化為SCAR標(biāo)記和利用特定堿基序列及基因連鎖圖譜克隆雄性基因奠定基礎(chǔ)。3.利用BLAST工具對(duì)美味獼猴桃和中華獼猴桃特異標(biāo)記S1032850的DNA片段堿基序列進(jìn)行了相似性分析，兩序列的相似性達(dá)97﹪。在CBI庫中，利用BLAST工具對(duì)美味獼猴桃特異標(biāo)記S1032850的DNA序列相似性分析發(fā)現(xiàn)，該序列與其它生物體DNA序