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1、該試驗以順式調(diào)控元件rd293cis構(gòu)建誘餌質(zhì)粒,通過酵母單雜交方法從水稻cDNA文庫中篩選獲得9個陽性質(zhì)粒,結(jié)果顯示陽性質(zhì)粒中插入的cDNA的序列一致,僅長度不同.根據(jù)核苷酸順序推導(dǎo)出cDNA編碼一個219氨基酸組成的多肽,網(wǎng)上同源序列比對表明,該多肽有一段保守的EREBP/AP2結(jié)構(gòu)域,N端為核定位信號(NLS),而C端則可能是一個轉(zhuǎn)錄的激活區(qū)域,屬于EREBP/AP2類轉(zhuǎn)錄因子.對經(jīng)過各種逆境、激素處理的水稻以及不同組織的水稻進行
2、RT-PCR分析,研究RdreB1基因在不同逆境、激素處理下的表達以及在不同組織中的表達情況,結(jié)果表明,在干旱和低溫脅迫誘導(dǎo)下水稻RdreB1基因存在過量表達.通過農(nóng)桿菌蘸花法將按植物偏愛密碼子重新合成的、與RdreB1基因的氨基酸序列相同的RdreB1I基因轉(zhuǎn)入擬南芥Columbia,通過GUS活性檢測和PCR、RT-PCR結(jié)果驗證獲得轉(zhuǎn)基因陽性植株,干旱和低溫生理實驗表明,與對照植株相比,大部分陽性植株都能夠耐受干旱脅迫和低溫凍害.
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