海藻中兩種與植物抗病相關(guān)銅結(jié)合蛋白的分離、特性和基因特征.pdf

1、一直以來,人們與植物病害的斗爭就沒有停止過.從生物中探尋具有抗病活性的天然產(chǎn)物并將其應(yīng)用于人類防治植物病害的實(shí)踐,是科學(xué)家所關(guān)注的一個(gè)重要課題.海藻因其特殊性,其中的活性蛋白質(zhì)及其編碼基因也必然具有特殊性.因此研究海藻中與抗植物病害相關(guān)的蛋白質(zhì)及其基因就有其重要意義.1.測定了16種海藻蛋白浸提液的抗病毒和抗真菌作用,發(fā)現(xiàn)海藻中存在著對(duì)煙草花葉病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)和馬鈴薯Y病毒壞死株系(Potato

2、virus Y,strain N,PVYN)的侵染以及真菌生長具有抑制作用的蛋白質(zhì),且具有多種蛋白質(zhì)組分,其抑制作用大小不一.并發(fā)現(xiàn)有7種供試海藻存在著對(duì)Gloeosporium musarum孢子的萌發(fā)具有抑制作用的蛋白質(zhì).2.在活性蛋白初篩的基礎(chǔ)上,重點(diǎn)選擇了孔石莼(Ulvapertusa Kjellm)作為進(jìn)一步開展抗病毒活性蛋白純化的對(duì)象.3.多酚氧化酶(PPO)是一種與生物的抗病性密切相關(guān)的酶,同時(shí)也是一種重要的含銅離子金屬蛋

3、白.經(jīng)測定,發(fā)現(xiàn)PPO活性在海藻中廣泛存在.4.采用降落PCR方法并結(jié)合RACE技術(shù),克隆得到了對(duì)PVY<'N>侵染具有抑制作用的UPG75的cDNA的全部核苷酸序列.5.對(duì)不同進(jìn)化程度的6種生物體,采用同樣的引物進(jìn)行PPO基因保守區(qū)的克隆.發(fā)現(xiàn)從低等的真核生物真菌中的香菇和紫孢側(cè)耳,至較高進(jìn)化的藻類鐵釘菜和孔石莼,到高等綠色植物芒果和香蕉,均能夠一次性克隆獲得PPO的基因,這同時(shí)也說明包括海藻在內(nèi),PPO基因在生物中是廣泛存在的.鑒于