24052.短引物的聚合反應(yīng)特性以及核苷酸衍生物對ecori的酶切阻滯作用

1、中國醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文獨創(chuàng)性聲明本人申明所呈交的學(xué)位論文是我本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得我?；蚱渌逃龣C構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料，與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。申請學(xué)位論文與資料若有不實之處，本人承擔(dān)一切相關(guān)責(zé)任。論文作者簽名：壟鯰匕日期：伽『f／f訓(xùn)中國醫(yī)

2、科大學(xué)研究生學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人完全了解中國醫(yī)科大學(xué)有關(guān)保護知識產(chǎn)權(quán)的規(guī)定，即：研究生在攻讀學(xué)位期間論文工作的知識產(chǎn)權(quán)單位屬中國醫(yī)科大學(xué)。本人保證畢業(yè)離校后，發(fā)表論文或使用論文工作成果時署名單位為中國醫(yī)科大學(xué)，且導(dǎo)師為通訊作者，通訊作者單位亦署名為中國醫(yī)科大學(xué)。學(xué)校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。學(xué)?？梢怨紝W(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容(保密內(nèi)容除外)，以采用影印、縮印或其他手段保存論文。論

3、文作者簽名：指導(dǎo)教師簽名：日期：鋤令0◆’I1么』)f卜D∞摘要中文論著摘要。甲又化者于l萄晏。短引物的聚合反應(yīng)特性以及核苷酸衍生物對EcoRI的酶切阻滯作用刖吾核酸是最重要的生物大分子之一。它是遺傳信息從親代向子代傳遞的物質(zhì)基礎(chǔ)。在細胞中，核酸的合成、切割、連接、變構(gòu)、修飾等眾多反應(yīng)無時不在，對于維持正常基因組的復(fù)制和修復(fù)、實施基因表達的調(diào)控具有重要的作用。包括聚合酶、內(nèi)切酶、連接酶、重組酶在內(nèi)的多種酶類參與了這些反應(yīng)。由于這些核酸作

4、用酶類獨特的酶促活性，它們成為許多基礎(chǔ)研究和應(yīng)用研究中的重要工具酶。其中DNA聚合酶和限制性核酸內(nèi)切酶(restrictionendonuclease，l也)是應(yīng)用最為廣泛的兩種酶。DNA聚合酶催化引物延伸反應(yīng)。它遵從堿基互補配對原則，以單鏈DNA為模板，將引物的3’末端不斷延伸，形成與模板鏈互補的雙鏈。通過‘解鏈一退火一延伸’的多次循環(huán)，DNA聚合酶可以使DNA模板得到上百萬倍的擴增，實現(xiàn)擴增微量核酸樣品的目的。聚合酶的應(yīng)用以及聚合酶

5、鏈反應(yīng)(polymerasechainreaction，PCR)技術(shù)的發(fā)明極大地推動了核酸研究的發(fā)展和進步。然而，即使在最常見的DNA聚合酶引物延伸反應(yīng)中，依然有許多尚未解決的問題。DNA聚合酶所能聚合的最短引物長度是多少不同聚合酶聚合所需的最短引物長度是否相同聚合酶在催化短引物時有何反應(yīng)特性催化效率受哪些因素的影響這些問題都有待系統(tǒng)的研究。限制性核酸內(nèi)切酶，特別是II類限制性核酸內(nèi)切酶，可以識別特定的核酸序列，并在特定的位點切斷核酸雙