27944.aa晶體蛋白基因啟動子與hsp16.3融合基因表達載體構(gòu)建及其在大鼠晶狀體上皮細胞的表達_第1頁
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1、遵義醫(yī)學院碩士學位論文aA晶體蛋白基因啟動子與HSP16.3融合基因表達載體構(gòu)建及其在大鼠晶狀體上皮細胞的表達姓名：朱紹玲申請學位級別：碩士專業(yè)：生物化學與分子生物學指導教師：葛正龍20100501遵義醫(yī)學院碩士學位論文ⅡA晶體蛋白基因啟動子與HSPl63融合基因表達載體構(gòu)建及其在大鼠晶狀體上皮細胞的表達ThefusiongeneexpressionvectorconstructionofaAcrystallinpromoterandH

2、SPl63geneanditsexpressioninratlensepitheliumcellsObjective：ThisprojectistoconstructthefusiongeneexpressionvectorofaAcrystallinpromoterandheatshockprotein163gene，andtodetectedtheexpressionofthefusiongeneinratlensepitheliu

3、mcellsMethods：HSPl63genewasamplifiedfrompET9d—HSP163byPCRandclonedintopBluescriptpBluescript—HSP163andpaACP—IRES2EGFPwerebothdoubledigestedandrecombinedaspaACPHSP163Restrictivedigestion，PCRandsequencingwereusedtoconfirmt

4、herecombinantplasmidconstructionPurifiedplasmidwasretrobulbarinjectedintorat1ellsTheEGFPgeneexpressioninthefrozensectionoftheratlenswasobservedbyfluorescentmicroscopeThemRNAexpressionofexogenousHSP163geneinratlenswasdete

5、ctedbyreversetranscriptPCRResults：Theconstructedrecombiantplasmid，paACP—HSP163，hada435bpfragmentofHSPl63gene，andthe435bpfragmentsequencedemonstrated100％homologywithHSP163genefromGenBankGreenfluorescencecanbeobservedinrat

6、lensafterinjectingpaACPHSPl63，butnearlyundetectedinotherpartsoftheeyeballTheHSP163mRNAexpressionexistedinlensepitheliumcellsofratinjectedpttACPHSPl63Conclusion：ThespecificexpressionvectorpromotedbyaACrystallin，paACP—HSP1

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