小麥儲藏蛋白基因Avenin-like b啟動子的克隆及表達載體構(gòu)建.pdf

1、小麥avenin-like b是最近發(fā)現(xiàn)的一類胚乳特異性表達蛋白質(zhì)，被稱為小麥“低分子量麥醇蛋白”，這類蛋白質(zhì)富含有半胱氨酸殘基，可以形成分子間或者分子內(nèi)的二硫鍵，通過這種二硫鍵的作用形成蛋白質(zhì)聚合體。因此，推測這類蛋白在小麥的加工品質(zhì)中有可能起著很重要的作用。本實驗室已經(jīng)分離獲得了多個小麥avenin-like b基因，并對其表達特性進行了研究。本研究在此基礎上，分離得到了avenin-like b基因的上游啟動子序列，并成功的構(gòu)建了

2、5種avenin-like b啟動子驅(qū)動的gus基因表達載體，為應用遺傳轉(zhuǎn)化的方法分析該啟動子表達特性奠定了基礎。
　　 主要研究結(jié)果如下：
　　 1)采用反向的PCR技術(shù)，獲得了avenin-like b基因上游的啟動子全長序列1664bp。
　　 2)通過應用PLACE和plantCARE等數(shù)據(jù)庫分析分離的啟動子元件，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，該啟動子除了具備啟動子的基本元件TATA-box、CAAT-box等，還含有胚

3、乳特異性表達的元件如：GCN4、TGTAAAG、Skn1-motif、AACA等。
　　 3)為了分析鑒定上述啟動子元件的作用，分別構(gòu)建了啟動子全長（1664bp）的表達載體pALP17及5，端缺失的不同長度啟動子（1000bp、800bp、600bp、300bp）的表達載體。
　　 小麥胚乳特異性啟動子的分離和功能鑒定有助于深入研究種子的發(fā)育機制以及儲藏蛋白基因的表達調(diào)控機制，分離并鑒定出具有高效的胚乳特異性表達的啟