植物細胞工程在花生育種應(yīng)用上的基礎(chǔ)研究.pdf

1、1.對花生組織培養(yǎng)進行研究，并建立了其高效植株再生體系.(1)以花生品種8823、白沙果及河南農(nóng)家品種成熟種胚發(fā)芽7d的幼葉為外植體，研究不同激素及其配比對花生不定芽、體細胞胚、花芽及植株再生的影響。結(jié)果表明：從添加NAA和BAP的誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，轉(zhuǎn)至添加BAP和ABA的再分化培養(yǎng)基上，獲得了50％-100％的不定芽發(fā)生率；當(dāng)將不定芽進一步轉(zhuǎn)移至植株再生培養(yǎng)基上時，植株再生率最高可達100％。在添加2，4-D和BAP的誘導(dǎo)培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)

2、，89％-100％的外植體脫分化形成胚胎發(fā)生叢(一團具有很強分裂能力的細胞團及發(fā)育成體細胞胚的潛力)，轉(zhuǎn)移至添加BAP和ABA的再分化培養(yǎng)基上時，43％-100％的外植體形成體細胞胚，當(dāng)將體細胞胚進一步轉(zhuǎn)移至植株再生培養(yǎng)基上，植株再生率最高可達96％。在添加NAA和BAP的基礎(chǔ)上，添加GA3，有利于花芽的分化，花芽分化的最高頻率為96％。(2)通過對不同花生品種及不同外植體進行不定芽的誘導(dǎo)，發(fā)現(xiàn)不同花生基因型和不同的外植體產(chǎn)生不定芽的頻

3、率存在較大差異?！　?.對花生原生質(zhì)體分離與培養(yǎng)條件進行研究。以花生品種8823、白沙果的體細胞胚及野生種Arachiscannadacii的嫩莖為供體，用含有PectolyaseY-23(0.1％)和CellulaseonozukaRS(2.0％)的酶液處理7小時左右，獲得大量的原生質(zhì)體。將原生質(zhì)體培養(yǎng)在添加1mg/LNAA和6mg/LBAP的改良MS液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)約2-3天后，可觀察到細胞分裂，并形成細胞團。繼續(xù)培養(yǎng)，形成小愈