29913.角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子(kgf)的表達(dá)及其生物學(xué)活性研究和成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體(fgfr)抑制劑穩(wěn)定轉(zhuǎn)染篩選模型的建立

1、廈門大學(xué)碩士學(xué)位論文角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子（KGF）的表達(dá)及其生物學(xué)活性研究和成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體（FGFR）抑制劑穩(wěn)定轉(zhuǎn)染篩選模型的建立姓名：許莉妍申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：微生物學(xué)指導(dǎo)教師：鄭忠輝20090709摘要分化和遷移。它們也可以激發(fā)原癌基因誘發(fā)腫瘤的形成和發(fā)展。本文的研究?jī)?nèi)容包括FGFR(舶roblastgrowthfactorsreceptor，F(xiàn)GFR)抑制劑穩(wěn)定篩選模型的建立，利用此穩(wěn)定篩選模型篩選微生物發(fā)酵粗提物，并且利

2、用westernblot檢測(cè)具有活性的粗提物對(duì)bFGF信號(hào)傳導(dǎo)通路的影響。利用穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的方法共轉(zhuǎn)染pCDNA31(一)和pGL3一SFiRE雙質(zhì)粒于NIH3T3細(xì)胞，通過(guò)G418抗性和熒光素酶反應(yīng)兩步篩選，建立穩(wěn)定的篩選模型，并得到了F10—9，A7—12，E卜9這三株pGL3一SFiRE—NIH3T3穩(wěn)定細(xì)胞株。通過(guò)這個(gè)篩選模型的篩選，最終得到了19l、LX、hZL02a一1、HQGa一9、Ty02b一5這5種具有抑制活性的粗提物。利

3、用westernblot檢測(cè)這些具有活性的粗提物對(duì)FGF信號(hào)傳導(dǎo)通路中關(guān)鍵酶的影響以及對(duì)FGFR的抑制情況。最終發(fā)現(xiàn)Ty02b一5和180這兩種粗提物抑制了FGFR的磷酸化，并且在對(duì)p—PLCy的檢測(cè)中發(fā)現(xiàn)經(jīng)過(guò)這兩種粗提物處理后p—PLCY的量明顯減少。說(shuō)明兩種粗提物中的某種成分可能是我們所尋找的bFGFR的抑制劑，并且通過(guò)PLCy途徑對(duì)bFGF的信號(hào)傳導(dǎo)產(chǎn)生影響。本部分的工作是階段性的，至于這兩種粗提物中的哪種成分對(duì)FGFR存在抑制，