水稻中一類(lèi)新的AtCRE1-like基因家族成員，OsCRL4基因的初步研究.pdf

1、AtCRE1是擬南芥中的細(xì)胞分裂素受體,有四個(gè)保守的結(jié)構(gòu)域,N端的CHASE結(jié)構(gòu)域,中間組氨酸激酶結(jié)構(gòu)域和C端的兩個(gè)受體結(jié)構(gòu)域.其中CHASE結(jié)構(gòu)域是細(xì)胞分裂素的結(jié)合位點(diǎn).就目前所知,細(xì)胞分裂素受體信號(hào)的感知和轉(zhuǎn)導(dǎo)都是被一個(gè)多級(jí)的磷酸接力系統(tǒng)通過(guò)雙元信號(hào)系統(tǒng)途徑進(jìn)行的,雙元信號(hào)系統(tǒng)在原核和低等的真核生物中,很早就已經(jīng)被了解了.為了研究水稻中細(xì)胞分裂素受體以及其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)路徑,通過(guò)同源序列的比對(duì),在水稻基因組中找到了5個(gè)含有CHASE結(jié)構(gòu)域

2、的基因,分別命名為OsCRL1a,OsCRL1b,OsCRL2,OsCRL3和OsCRL4.其中OsCRL1a,OsCRL1b,OsCRL2,OsCRL3和擬南芥中的CRE1基因結(jié)構(gòu)相似,具有類(lèi)似的四個(gè)保守結(jié)構(gòu)域,而OsCRL4只具有CHASE結(jié)構(gòu)域,但有一個(gè)絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶結(jié)構(gòu)域.我們對(duì)OsCRL4基因進(jìn)行了研究,研究結(jié)果如下:1.對(duì)水稻中含有CHASE結(jié)構(gòu)域的蛋白家族進(jìn)行同源性分析并克隆了OsCRL4基因.通過(guò)同源性分析表明O

3、sCRL1a/b與AtCRE1親緣關(guān)系最近,而OsCRL4與CRE1親緣關(guān)系最近.2.研究了OsCRL4的表達(dá)模式.通過(guò)RT-PCR,初步確定了OsCRL4基因主要在根部和幼嫩的小穗中表達(dá),通過(guò)構(gòu)建OsCRL4::GUS的轉(zhuǎn)基因植物,研究了它的表達(dá)模式.切片分析表明,OsCRL4主要在水稻側(cè)根的韌皮部和中柱鞘表達(dá).3.通過(guò)構(gòu)建35S∷CRL4植物表達(dá)載體來(lái)互補(bǔ)擬南芥突變體crel-1根伸長(zhǎng)的表型,初步確定了具有類(lèi)似于細(xì)胞分裂素受體蛋白的