稻瘟菌誘導(dǎo)性水稻蛋白激酶基因的cDNA克隆及其功能研究.pdf

1、該研究以水稻稻瘟病為體系,以闡明稻瘟菌誘導(dǎo)的蛋白激酶在水稻抗稻瘟菌中所起的作用為目標,首先通過反向northern確認了非親和性稻瘟菌侵染稻葉中分離的一個差異顯示cDNA片斷S2的抗病誘導(dǎo)性,然后以它為探針,篩選抗病稻葉的cDNA文庫,獲得了與探針相對應(yīng)的水稻cDNA克隆Oswak2.不同因素刺激下該基因的誘導(dǎo)表達時間動態(tài)初步推斷該基因和水稻抗稻瘟菌有關(guān).為進一步搞清Oswak2及其它兩個稻瘟菌侵染誘導(dǎo)的Osepkl和Oseptil基因

2、在水稻抗稻瘟菌中的作用,構(gòu)建了能形成這幾個基因sense轉(zhuǎn)錄物、antisense轉(zhuǎn)錄物和mRNAduplex結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)錄物的植物轉(zhuǎn)化雙元載體,并通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化了水稻,共獲得了372株轉(zhuǎn)基因植株.采用稻葉離體接種的方法對這些轉(zhuǎn)基因水稻同時進行了稻瘟菌親和性和非親和性小種的接種.另外,為了研究水稻抗稻瘟菌的抗病分子機制,還利用酵母雙雜交體系,對Oseptil和Oswak2的作用蛋白進行了研究,通過篩選抗病稻葉的酵母表達文庫,初步得到了和O