睪丸特異蛋白激酶TSSK4的基因克隆及功能初探.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本文通過EST同源篩選的方法,用TSSK(testis-specific serine/threonine kinase)1,2,3的cDNA為信息探針在GenBank數據庫中發(fā)現了一個新的同源基因,在人的睪丸組織cDNA文庫中將其克隆,該cDNA序列包含了984個堿基的開放閱讀框,編碼一個328個氨基酸的蛋白質。該蛋白質具有一個保守的絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶結構域,氨基酸序列比較顯示這個新的推導蛋白與TSSK1,TSSK2,TSSK3有

2、較高的同源性,可能是這個亞家族的第四個成員,故命名為TSSK4。同樣的方法獲得小鼠的同源基因tssk4。組織表達譜分析表明TSSK4也只在睪丸組織中表達,免疫組化定位分析表明tssk4主要在小鼠睪丸中的單倍體的圓形精子細胞中表達。 為了研究TSSK4的生理功能,選擇以酵母雙雜交的方法篩選互作蛋白作為切入點,從人的睪丸cDNA文庫中篩選到了一個能與TSSK4互作的蛋白——cAMP應答元件結合蛋白CREB。體外GST pull-do

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