TaMlo3基因克隆與功能分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、該研究根據(jù)大麥、擬南芥等植物中Mlo基因的保守序列設(shè)計了多對引物,運用RT-PCR技術(shù)成功地克隆了一個513bp的小麥Mlo基因cDNA片段（命名為TaMlo3,GenBank接受號為AF336105）.而后利用RACE技術(shù)成功的從小麥cDNA中得到該基因的3′片段,兩次克隆共得到1322bp的TaMlo基因片段,該片段已包含Mlo基因的主要功能區(qū)域,編碼440個氨基酸,其中包括5個跨膜區(qū)域、1個20個氨基酸的鈣調(diào)素結(jié)合位點、1個核定位

2、序列（KKKVR）以及多個磷酸化位點.用TaMlo3基因3′的800bp片段做探針,對不同抗性品種麥類作物及感病品種不同誘導(dǎo)時期的Mlo基因的表達(dá)情況做Northern雜交分析.結(jié)果發(fā)現(xiàn)抗病品種中Mlo的表達(dá)豐度非常的低,而在感病品種中,其表達(dá)量在接種后6小時達(dá)到最低,以上結(jié)果表明Mlo的表達(dá)可能與抗性抑制相關(guān).另一方面,該研究采用膠體金標(biāo)記方法對MLO蛋白的上游結(jié)合因子-鈣調(diào)素在小麥與白粉病菌互作過程中表皮細(xì)胞中的分布模式進行了細(xì)胞學(xué)

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