TaMlo3基因克隆與功能分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、該研究根據(jù)大麥、擬南芥等植物中Mlo基因的保守序列設(shè)計了多對引物,運用RT-PCR技術(shù)成功地克隆了一個513bp的小麥Mlo基因cDNA片段（命名為TaMlo3,GenBank接受號為AF336105）.而后利用RACE技術(shù)成功的從小麥cDNA中得到該基因的3′片段,兩次克隆共得到1322bp的TaMlo基因片段,該片段已包含Mlo基因的主要功能區(qū)域,編碼440個氨基酸,其中包括5個跨膜區(qū)域、1個20個氨基酸的鈣調(diào)素結(jié)合位點、1個核定位

2、序列（KKKVR）以及多個磷酸化位點.用TaMlo3基因3′的800bp片段做探針,對不同抗性品種麥類作物及感病品種不同誘導(dǎo)時期的Mlo基因的表達情況做Northern雜交分析.結(jié)果發(fā)現(xiàn)抗病品種中Mlo的表達豐度非常的低,而在感病品種中,其表達量在接種后6小時達到最低,以上結(jié)果表明Mlo的表達可能與抗性抑制相關(guān).另一方面,該研究采用膠體金標記方法對MLO蛋白的上游結(jié)合因子-鈣調(diào)素在小麥與白粉病菌互作過程中表皮細胞中的分布模式進行了細胞學(xué)

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