水稻OsCBP20基因的克隆與功能分析.pdf

1、非生物逆境影響著水稻的生長(zhǎng)、谷物產(chǎn)量與品質(zhì)，探究不同的逆境信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路對(duì)于確保水稻穩(wěn)產(chǎn)與品質(zhì)具有非常重要的意義。
　　RNA結(jié)合蛋白(RBP)是植物體內(nèi)一種重要的蛋白質(zhì)，已經(jīng)證明它們參與多種逆境下RNA的轉(zhuǎn)錄后調(diào)控。本文利用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)從水稻cDNA文庫(kù)中克隆到一個(gè)逆境應(yīng)答基因，包含一個(gè)典型的RNA識(shí)別模塊(RRM)，編碼核帽結(jié)合蛋白復(fù)合體的20kDa亞基，因此命名為OsCBP20。該基因開(kāi)放閱讀框編碼243個(gè)氨基酸，預(yù)測(cè)分子量

2、28.6kDa，等電點(diǎn)5.14。亞細(xì)胞定位發(fā)現(xiàn)OsCBP20定位在細(xì)胞核。半定量RT-PCR分析不同逆境下OsCBP20的表達(dá)情況，高溫、高鹽、干旱誘導(dǎo)該基因表達(dá)。融合蛋白表達(dá)分析，OsCBP20在大腸桿菌體內(nèi)高效表達(dá)。原核表達(dá)逆境分析顯示，重組細(xì)胞在高鹽、干旱、高溫條件下生存率比對(duì)照細(xì)胞高。對(duì)T2代轉(zhuǎn)基因水稻植株進(jìn)行鹽脅迫、干旱脅迫以及高溫脅迫處理后發(fā)現(xiàn)，過(guò)量表達(dá)水稻植株的存活率明顯高于反義抑制表達(dá)水稻植株和對(duì)照日本晴植株。這說(shuō)明，O