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文檔簡介
1、該研究圍繞該候選基因和秈粳不育完成了以下工作：1.對候選基因進行了表達分析,RT-PCR結(jié)果顯示候選基因在秈粳品種和廣親和品種的花器官中均有表達;2.將對應(yīng)候選基因3’端的shotgun亞克隆4A9反方向接入35S啟動子和nos終止子之間,并構(gòu)建了以pCAMBIA1301為基礎(chǔ)的反義（antisense）轉(zhuǎn)化載體;3.通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)法將反義構(gòu)建體轉(zhuǎn)化粳稻品種牡丹江8號,共獲得T0代轉(zhuǎn)基因單株153株,報告基因PCR平均陽性率為93﹪;以
2、T0代轉(zhuǎn)基因植株與秈稻珍汕97雜交或T1代株系的混合花粉授予珍汕97,共得到測交F,<,1>代雜交組合54個,育性考查發(fā)現(xiàn)同一株系內(nèi)轉(zhuǎn)基因單株的平均結(jié)實率相對于未轉(zhuǎn)基因單株沒有顯著提高;RT-PCR檢測到T0代轉(zhuǎn)基因植株中反義片段的表達.4.抽提明恢63花藥/柱頭cDNA文庫質(zhì)粒6144個,制成高密度cDNA點陣膜;分別用南京11/秋光（秈粳交）F<,1>代和南京11/02428（秈/廣親和）F<,1>代花藥柱頭混合RNA反轉(zhuǎn)錄成的cD
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