水稻廣親和基因的功能鑒定.pdf

1、水稻秈粳亞種間具有很強的雜種優(yōu)勢，然而，由于雜種的半不育特性，限制了其優(yōu)勢的進一步利用。值得慶幸的是水稻育種家們發(fā)現(xiàn)有些水稻品種與秈稻或粳稻雜交育性均表現(xiàn)正常，這樣的品種稱為廣親和品種，這一發(fā)現(xiàn)為秈粳亞種間雜種優(yōu)勢的利用提供了可能。研究表明控制這一性狀的廣親和基因Sn5位于水稻第6號染色體上。 本實驗室先前的研究將S5n精細定位到分子標記J13和J17之間，物理距離為50Kb。對此區(qū)間的序列進行預測，確定了兩個廣親和候選基因，A

2、sp和CG2，分別編碼天冬氨酸蛋白酶和一個功能未知的蛋白。對每一個候選基因，我們都構建二類表達載體，即過量表達載體和功能互補測驗載體，而后將這些表達載體通過農桿菌介導轉入到不含有廣親和基因的受體材料中，檢測后代小穗育性，確定廣親和基因。結果如下： 1.直接以‘Balilla’ב南京11’的雜交種為受體獲得6個轉化系，在海南種植，并檢查小穗育性。候選基因Asp的轉基因植株與未轉任何載體的組培材料相比，小穗育性無明顯差異；轉基因植

3、株與轉空白載體的陰性對照相比，小穗育性明顯提高，差異達顯著水平，但平均育性仍然很低。 2.以二個粳稻品種，‘Balilla’和‘武香粳’，為受體獲得轉基因植株，將這些轉基因材料與秈稻品種‘南京11’雜交，同時檢測雜交后代的基因型和小穗育性。結果表明只有一株轉基因‘武香粳’(轉Asp過量表達載體)與‘南京11’的雜種后代中，攜帶候選基因的雜種比同背景的不帶候選基因的雜種平均育性提高14.15％，達極顯著水平，并且平均育性高于50％