棗果實病原真菌的鑒定及鏈格孢屬病原真菌多樣性研究.pdf

1、近年來棗果實病害種類和危害程度不斷增加，嚴重時可造成絕產(chǎn)絕收。已報道的果實病害中同病異名和同菌異名現(xiàn)象普遍。棗果實病害病名和病原種類的混亂和不確定性，給該類病害的預測、防治及學術交流帶來了障礙。本文對中國幾個主要棗產(chǎn)區(qū)（河南省新鄭、濮陽、登封，新疆阿拉爾，河北石家莊，山東省沾化等地）棗果實病害進行了較為系統(tǒng)的調(diào)查研究，詳細觀察了各棗產(chǎn)區(qū)主要棗果病害的癥狀特點及發(fā)病情況，對不同類型病果病原菌進行了分離純化和保存、致病性測定以及形態(tài)鑒定和分

2、子鑒定。從六種不同癥狀病果上共分離鑒定出8種病原真菌及部分未定名真菌。首次發(fā)現(xiàn)并證明層出鐮刀菌Fusarium proliferatum和尖孢鐮刀菌Fusarium oxysporum可引起棗田間軟腐病。首次從新鄭棗縮果病果實中分離出能夠引起棗果發(fā)病的鴨梨鏈格孢Alternariayaliinficiens R.G.Roberts。對于能夠引起多種棗果實病害癥狀的鏈格孢屬病原真菌，選取了56株具有代表性種的菌株進行ISSR遺傳多樣性分析

3、。本研究為棗果實病害的準確鑒定、致病規(guī)律和科學防治研究奠定基礎。具體實驗結果如下。
　　1.對我國主要棗主產(chǎn)區(qū)的棗果病害樣本進行收集并對分離菌株進行整理和鑒定
　　2011-2012年分別于河南省新鄭市灰棗、濮陽市扁核酸、登封市冬棗、梨棗，河北石家莊扁核酸、滄州金絲小棗，新疆阿拉爾灰棗、阿克蘇駿棗，山東沾化冬棗、泰安冬棗等，共收集病果標本十六批二百多個。對發(fā)病果實發(fā)病部位進行組織分離、純化、保存病原菌，并用分離物進行室內(nèi)回接

4、和田間回接，致病性測定和病原種鑒定。對以上病果進行分離，共分離到菌株483株，經(jīng)過科赫氏法則驗證確定為能夠致病的菌株有256株，依據(jù)真菌的傳統(tǒng)形態(tài)特征鑒定方法結合現(xiàn)代分子鑒定方法對病原菌進行準確鑒定。
　　2.采集6種棗果病害類型樣本
　　收集到的田間病果主要有以下類型:河南省濮陽地區(qū)的棗縮果病、軟腐病、黑斑病，新鄭棗地區(qū)炭疽病、棗軟腐病，登封地區(qū)黑斑病和一種輪紋斑病，新疆阿拉爾地區(qū)的一種小病斑型病害六種棗果病害類型。

5、>　　3.對棗果病害病原菌的鑒定
　　棗縮果病病原菌種類較為復雜，除了已報道的七葉樹殼梭孢Fusicoccum aesculi Corda、頭狀莖點霉Phoma glomerata、鏈格孢Alternaria alternate(Fr.) Keissler和細極鏈格孢Alternaria tenuissima(Fr.) Wiltshire之外，本研究還分離到了棗縮果病樣本中的鴨梨鏈格孢Alternariayaliinficiens

6、 R.G.Roberts，這種新的病原菌單獨接種時未產(chǎn)生典型的棗縮果病癥狀，但是其回接發(fā)病率也是較為顯著的。棗炭疽病除了分離到已報道的膠孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioides之外，還分離到了一種鏈格孢屬病原真菌，其接種時田間癥狀為黑色凹陷病斑。引起棗軟腐病的病原菌第一次分離到了層出鐮刀菌Fusarium proliferatum和尖孢鐮刀菌Fusarium oxysporum，這兩種病原均能引起棗果軟腐。除

7、此之外七葉樹殼梭孢Fusicoecum aeseuli Corda也是能引起棗果軟腐病害的病原之一。從棗黑斑病中主要分離到了鴨梨鏈格孢Alternariayaliinficiens R.G.Roberts和七葉樹殼梭孢Fusicoccum aesculi Corda，這與之前的報道不盡相似。新疆的小型病斑樣本中主要分離到了鏈格孢Alternaria alternate(Ft.)Keissler和細極鏈格孢Alternaria tenui

8、ssima(Fr.)Wiltshire。棗輪紋斑病樣本中分離到的病原菌除了細極鏈格孢Alternaria tenuissima(Fr.)Wiltshire之外，還有鴨梨鏈格孢Alternariayaliinficiens R.G Roberts。
　　4.采用ISSR技術和分子鑒定對引起棗果病害的鏈格孢屬病原真菌進行研究
　　對于能夠引起棗果病害的鏈格孢屬病原真菌，選取其中有代表性的菌株56株，對其進行ISSR遺傳多樣性分析