常用抗菌藥聯(lián)合作用及亞-MIC抗菌藥對細菌成膜能力的影響.pdf

1、近年來獸醫(yī)臨床上，抗菌藥濫用現(xiàn)象頻發(fā)，譬如:應用抗菌藥作為日常預防性用藥和動物促生長劑;不按獸醫(yī)師指導用藥;對于病因不明的，比如真菌或病毒感染濫用抗菌藥，而導致抗菌藥無效;對混合或嚴重感染無依據的采用2種或更多抗菌藥聯(lián)合使用。這些無疑加重了細菌耐藥性產生，直接導致臨床上抗菌藥使用處于亞抑菌濃度（Subinhibitory concentration，sub-MIC）狀態(tài)，而亞-MIC的應用多與成膜菌有關聯(lián)，主要用于預防用藥，通過抑制細菌

2、形成生物被膜，來避免慢性感染的發(fā)生。
　　目的:本試驗在原有抗菌藥分類的基礎上，增添了喹諾酮類，利福霉素類，林可胺類及中藥提取單體-黃連素，研究藥物之間的相互作用，金黃色葡萄球菌、大腸桿菌及巴氏桿菌為臨床分離的受試菌株，分別作為革蘭氏陽性菌及陰性菌的代表;另外，篩選成膜菌，考察亞-MIC抗菌藥對其生物被膜形成的影響。以期通過本試驗的研究可以為獸醫(yī)臨床用藥提供一定的理論依據，改善不當的藥物聯(lián)合用藥情況，同時，也警示人們亞抑菌濃度抗菌

3、藥的使用必須以試驗室研究結果作為基礎依據。
　　方法:試驗選用微量稀釋法測定單藥的最小抑菌濃度（Minimal inhibitory concentration，MIC），而后根據測出的MIC確定聯(lián)合用藥濃度，通過微量棋盤稀釋法測定各藥聯(lián)合的部分抑菌濃度（Fractional inhibitory concentration，F(xiàn)IC）。測定亞-MIC抗菌藥對成膜菌被膜形成的影響是采用結晶紫染色法，通過測定光密度（Opticalde

4、nsity，OD）值來評估其對成膜能力的影響。
　　結果:(1)革蘭氏陽性菌的代表金黃色葡萄球菌聯(lián)合用藥結果如下:原有抗菌藥分類下四類抗菌藥聯(lián)用情況與以往相符;恩諾沙星與頭孢噻呋聯(lián)用表現(xiàn)為相加作用，與多西環(huán)素，氟苯尼考和磺胺二甲嘧啶配伍表現(xiàn)為拮抗作用;利福平與頭孢噻呋和多西環(huán)素聯(lián)用表現(xiàn)為相加作用，與卡那霉素和氟苯尼考聯(lián)用表現(xiàn)為拮抗作用;黃連素與氟苯尼考和磺胺二甲嘧啶配伍表現(xiàn)為相加作用，無拮抗作用，但與頭孢噻呋和泰萬菌素聯(lián)用時，其F

5、IC=1.5表示當兩者與黃連素聯(lián)用時，可以減量應用;林可霉素與其它抗菌藥聯(lián)用沒有出現(xiàn)協(xié)同/相加作用，與泰萬菌素和硫酸黏菌素表現(xiàn)為拮抗作用;其它未提及的聯(lián)用結果均為無關作用。
　　(2)以大腸桿菌、巴氏桿菌為代表的革蘭氏陰性菌聯(lián)合用藥結果如下:原有抗菌藥分類下四類抗菌藥聯(lián)用情況與以往基本相符，唯繁殖期殺菌藥與快速抑菌藥聯(lián)用并未出現(xiàn)嚴格的拮抗作用，表現(xiàn)為FIC=1.5無關作用時，考慮到毒性大小及經濟成本，可將一種藥物劑量減少應用;恩諾

6、沙星與頭孢噻呋、硫酸黏菌素、磺胺二甲嘧啶和黃連素聯(lián)用表現(xiàn)為協(xié)同/相加作用，偶有無關作用出現(xiàn)，與氟苯尼考和利福平配伍表現(xiàn)為拮抗或無關作用;利福平與硫酸黏菌素、多西環(huán)素、氟苯尼考和黃連素聯(lián)用表現(xiàn)為相加或無關作用，與卡那霉素、林可霉素和恩諾沙星合用表現(xiàn)為拮抗或無關作用;黃連素與阿莫西林和氟苯尼考配伍表現(xiàn)為無關作用，與林可霉素表現(xiàn)為無關作用FIC=1.5，提示可以減量應用一種藥物，與其它類別均表現(xiàn)為相加/協(xié)同作用;林可霉素與硫酸黏菌素和磺胺二甲

7、嘧啶聯(lián)用表現(xiàn)為協(xié)同/相加作用，與阿莫西林、卡那霉素、泰萬菌素、氟苯尼考和利福平則表現(xiàn)為拮抗作用;其余組合為無關作用。
　　(3)金黃色葡萄球菌與空白組相比具有較強的生物被膜形成能力，為強成膜能力株，經過試驗條件篩選，確定于37℃，TSB肉湯培養(yǎng)2d作為最適條件，考察卡那霉素、硫酸黏菌素、泰萬菌素、克拉霉素、恩諾沙星、黃連素及林可霉素等7種抗菌藥亞-MIC對金黃色葡萄球菌成膜量的影響。結果表明，黃連素和林可霉素在較高亞-MIC濃度時