養(yǎng)殖花鰻鱺與太平洋雙色鰻鱺主要病原菌的研究.pdf

1、本文主要研究了養(yǎng)殖花鰻鱺與太平洋雙色鰻鱺的病原菌。通過在不同季節(jié)采集病鰻并從鰓、肝臟等病灶分離菌株，應用本實驗室自主開發(fā)的30株病原菌血清試劑盒進行檢測，對未能檢出的菌株，依據(jù)菌體形態(tài)、常規(guī)生理生化鑒定及Biolog系統(tǒng)進行鑒定。對新分離菌株進行人工感染試驗，同時研究了五倍子、大黃、石榴皮等10味中藥對新分離菌株的體外抑菌效果。主要結(jié)果如下：
　　1.在不同季節(jié)采集病鰻并從病灶處分離菌株，應用血清試劑盒進行檢測，對未能檢出的菌株進

2、行鑒定。結(jié)果顯示：能被血清試劑盒檢出的花鰻鱺病鰻共120尾，檢測到致病菌15株（B06、B08、B09、B10、B11、B16、B18、B19、B20、B21、B26、B27、B30、B32、B43）；未能檢出的花鰻鱺病鰻共52尾，分離純化得到29株菌，篩選后經(jīng)生化鑒定為9株菌，包括嗜水氣單胞菌、鮑氏不動桿菌、嗜水氣單胞菌DNA組1型、弗氏檸檬酸桿菌、遲鈍愛德華氏菌各1株，獸生氣單胞菌和門多薩假單胞菌各2株。能被血清試劑盒檢出的太平洋雙

3、色鰻鱺病鰻共86尾，檢測到致病菌15株（B04、B05、B06、B08、B10、B11、B12、B14、B18、B19、B21、B26、B27、B31、B32）；未能檢出的太平洋雙色鰻鱺病鰻共34尾，分離純化得到12株菌，篩選后經(jīng)生化鑒定為4株菌，包括嗜水氣單胞菌、遲鈍愛德華氏菌1群、類志賀鄰單胞菌及豚鼠氣單胞菌各1株。
　　2.挑選新分離菌株進行人工感染試驗，從中選取毒性較強的菌株測定其對鰻鱺的半致死濃度（LD50）。結(jié)果顯示：

4、9株菌有5株（嗜水氣單胞菌、嗜水氣單胞菌DNA組1型、獸生氣單胞菌、門多薩假單胞菌及弗氏檸檬酸桿菌）對健康花鰻鱺有明顯的致病性，其LD50分別為3.16×106CFU/mL、2.15×106CFU/mL、2.15×106CFU/mL、4.64×106CFU/mL及3.2×107CFU/mL。4株菌（嗜水氣單胞菌、遲鈍愛德華氏菌1群、類志賀鄰單胞菌及豚鼠氣單胞菌）對太平洋雙色鰻鱺均有明顯的致病性，其LD50分別為1.47×107CFU/m

5、L、1.78×106CFU/mL、3.52×107CFU/mL及3.98×106CFU/mL。
　　3.從規(guī)格及季節(jié)兩方面對養(yǎng)殖花鰻鱺與太平洋雙色鰻鱺主要病原菌的種類以及流行規(guī)律進行研究，結(jié)合血清試劑盒檢測與人工感染試驗結(jié)果表明：花鰻鱺共檢測161尾，檢測到致病菌20株，其中B26在五種規(guī)格的花鰻鱺中均能檢測到，B19、B21等6株菌在三個季節(jié)中也均能夠檢出；太平洋雙色鰻鱺共檢測了112尾，檢測到病原菌19株，其中B26在五種規(guī)格

6、的太平洋雙色鰻鱺中均能檢測到，B18、B32等5株菌在三個季節(jié)中也均能夠檢出。
　　4.挑選五倍子、大黃、石榴皮等10味中藥，在體外測定其單用、雙聯(lián)用以及三聯(lián)用對8株新分離的養(yǎng)殖花鰻鱺以及太平洋雙色鰻鱺病原菌的抑菌效果。結(jié)果顯示：10味中藥對8株病原菌均具有較好的抑菌效果，平均MIC范圍為1.69-13.14mg/mL；挑選單用藥效較好的5種中藥而設計10種雙聯(lián)用復方進行試驗，試驗結(jié)果表明雙聯(lián)用復方的抑菌效果較單用時有所提高，均起

7、到較好的協(xié)同作用；根據(jù)中藥單用和雙聯(lián)用抑菌試驗結(jié)果，選取4種中藥進行三聯(lián)用中藥復方篩選。結(jié)果顯示，中藥三聯(lián)用復方對8株病原菌均有協(xié)同作用，且可以大大降低單種中藥的使用量。
　　本研究結(jié)果表明：對于花鰻鱺，血清試劑盒檢測到病原菌15株，新分離病原菌5株；對于太平洋雙色鰻鱺，血清試劑盒檢測到病原菌15株，新分離病原菌4株。攻毒試驗證實各菌株的毒力存在較大差異性。兩種鰻鱺的主要病原菌具有一定的種類、季節(jié)和規(guī)格的特異性。中藥聯(lián)用可以有效提