養(yǎng)殖鰻鱺致病性氣單胞菌的分離與鑒定.pdf

1、本文主要研究養(yǎng)殖患病鰻鱺的致病性氣單胞菌。從患病鰻鱺的病灶分離得到試驗(yàn)菌株，選擇生理生化指標(biāo)具有明顯差異的氣單胞菌進(jìn)行攻毒感染試驗(yàn)。以致病性的氣單胞菌為研究對(duì)象，利用Biolog自動(dòng)微生物鑒定系統(tǒng)和基因序列分析方法對(duì)這些菌株進(jìn)行準(zhǔn)確的菌種分類(lèi)和鑒定，同時(shí)分析這些菌株對(duì)抗生素藥物的敏感性。主要結(jié)果如下：
　　 1.對(duì)9批養(yǎng)殖患病鰻鱺細(xì)菌性疾病的病原進(jìn)行了研究，從患病鰻鱺肝臟和腎臟等部位共分離得到56株菌，經(jīng)生化試劑盒鑒定篩選了其中

2、5株氣單胞菌菌用于攻毒感染試驗(yàn)，結(jié)果表明有3株可明顯引起注射鰻鱺發(fā)病和死亡，這些致病菌被初步鑒定為獸生氣單胞菌、波波夫氣單胞菌和異嗜糖氣單胞菌。
　　 2.以5株新分離的致病性氣單胞菌和27株試驗(yàn)室保存的未鑒定至種的致病性氣單胞菌為材料，采用Biolog自動(dòng)微生物鑒定系統(tǒng)對(duì)這些菌株進(jìn)行鑒定。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：32株氣單胞菌分為5個(gè)種，包括有21株嗜水氣單胞菌，7株維氏氣單胞菌，1株豚鼠氣單胞菌，2株簡(jiǎn)達(dá)氣單胞菌和1株獸生氣單胞菌。其

3、中25株的鑒定值可信度較高，可能性大于80%，另外7株的鑒定可能性值較低，包括有2株嗜水氣單胞菌B50和B65(可能性分別為0.582和0.732)，3株維氏氣單胞菌B41、B67和B73(可能性分別為0.617、0.201和0.300)，1株簡(jiǎn)達(dá)氣單胞菌B21(可能性為0.461)和1株獸生氣單胞菌B53(可能性為0.740)。
　　 3.采用16S rRNA、cpn60、rpoB、gyrB和dnaJ五個(gè)基因的序列分析方法對(duì)3

4、2株致病性氣單胞菌進(jìn)行鑒定。結(jié)果顯示：32株氣單胞菌分為4個(gè)種：嗜水氣單胞菌21株、維氏氣單胞菌7株、豚鼠氣單胞菌2株和簡(jiǎn)達(dá)氣單胞菌2株。功能基因cpn60和dnaJ對(duì)氣單胞菌的聚類(lèi)分析中，其平均遺傳距離分別為0.082和0.089，明顯高于其余三個(gè)基因，可考慮作為鑒定鰻鱺致病性氣單胞菌的重要依據(jù)。
　　 4.以12類(lèi)(30種)抗生素藥物研究32株致病性氣單胞菌對(duì)藥物的敏感性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，慶大霉素、阿米卡星、頭孢他啶、頭孢噻肟

5、、卡那霉素、洛美沙星、呋喃妥因、哌拉西林、左氧氟沙星、壯觀霉素、鏈霉素、阿奇霉素、氟哌酸、頭孢曲松、強(qiáng)力霉素、頭孢呋辛等19種藥物對(duì)大部分致病性氣單胞菌敏感；而新生霉素、頭孢克羅、頭孢拉定、頭孢唑林、頭孢噻吩、利福平、復(fù)方新諾明、氨芐西林、乙酰螺旋霉素、羧芐青霉素、青霉素等11種藥物對(duì)大部分菌株表現(xiàn)為耐藥。
　　 5.本研究采用Biolog自動(dòng)微生物鑒定系統(tǒng)和基因序列分析方法對(duì)32株分離于養(yǎng)殖患病鰻鱺的致病性氣單胞菌進(jìn)行鑒定。實(shí)