水稻核糖核酸酶T2蛋白質(zhì)在葉片生長和鹽脅迫過程中的表達研究.pdf

1、背景:水稻是世界上最重要的糧食作物之一，同時也是基礎研究的模式植物之一。核糖核酸酶（Ribonucleases，RNase，RNS）普遍存在于各種生物中，其保守性提示了功能的重要性。鹽脅迫造成的影響幾乎涉及所有的生理和生化過程，嚴重時導致水稻不能正常生長、減產(chǎn)甚至絕收。對抗鹽逆境分子機理的研究對水稻生產(chǎn)具有重要的意義。已有研究表明，水稻RNS家族成員在生長發(fā)育和抗逆過程中發(fā)揮著重要作用。
　　 研究目的:制備針對水稻RNS基因編

2、碼的蛋白質(zhì)的特異性抗體，了解水稻RNS基因編碼蛋白質(zhì)在葉片不同發(fā)育時期以及鹽脅迫下的表達模式，為其功能的研究提供線索及依據(jù)。
　　 材料與方法:對候選基因編碼的蛋白質(zhì)進行抗原決定簇的預測，選出抗原決定簇峰值較高的片段后，合成多肽偶聯(lián)后免疫新西蘭大白兔進行多克隆抗體的制備。用Western blotting檢測RNS蛋白質(zhì)在水稻品種93-11的苗期1 cm、2 cm、5cm、10 cm、15 cm、分蘗期、孕穗期、開花期和成熟期葉

3、片中的表達，同時檢測RNS蛋白質(zhì)在水稻品種93-11鹽處理后不同時間點的表達變化，并與水稻MPSS數(shù)據(jù)庫中葉片苗期的轉錄信息進行比較分析。
　　 結果:通過Western blotting技術檢測到OsRNS1-OsRNS7蛋白質(zhì)在葉片中有表達，其中OsRNS4主要在苗期表達，揭示其在苗期發(fā)揮作用，其它蛋白質(zhì)則主要在成熟期表達，但未檢測到OsRNS8的表達;水稻OsRNS4在鹽脅迫條件下表達上調(diào)，其它RNS蛋白質(zhì)大都隨鹽脅迫時間

4、的延長而下降。將水稻RNS蛋白質(zhì)的表達與轉錄信息進行比較，發(fā)現(xiàn)二者在部分基因中有一定的相關性。
　　 結論:通過對OsRNS在葉片生長過程中的表達分析，發(fā)現(xiàn)在苗期特異性表達的蛋白質(zhì)OsRNS4，主要在苗期表達，成熟期后未檢測到表達，說明它有可能參與到水稻苗期的某些生命活動中。其他蛋白質(zhì)主要在成熟期葉片中表達，苗期表達較低。本實驗還研究了RNS蛋白質(zhì)在水稻品種93-11鹽脅迫過程中的表達情況，發(fā)現(xiàn)OsRNS4蛋白質(zhì)隨著鹽脅迫時間的