水稻類鈣調(diào)磷酸酶亞基B蛋白質(zhì)在逆境脅迫下的表達研究.pdf

1、背景:鈣信號鈣離子被認為是具有廣譜作用的第二信使，在植物中，胞內(nèi)鈣離子的水平受各種因素的影響，如非生物脅迫、病原物及激素等。逆境是指顯著偏離植物最適生活條件的環(huán)境。逆境的影響廣泛涉及各種植物生理和生化過程，嚴重時影響植物的正常生長甚至導(dǎo)致死亡。水稻作為世界上最重要的糧食作物之一，同時也是基礎(chǔ)研究的模式植物，比較容易受各種逆境的影響從而造成減產(chǎn)甚至絕收，因此了解水稻感知和抵抗環(huán)境脅迫的機理就顯得尤為重要。類鈣調(diào)磷酸酶亞基B蛋白質(zhì)(Calc

2、ineurinB-like protein，CBL)只存在于植物中，其與CIPK(CBL-interacting protein kinase，CIPK)形成鈣信號傳遞的通路之一。已有研究表明，水稻CBL家族成員在調(diào)控植物對逆境脅迫的反應(yīng)中發(fā)揮作用。
　　 研究目的:針對水稻CBL基因家族編碼蛋白質(zhì)制備對應(yīng)的抗體，探究CBL家族蛋白質(zhì)在水稻9311的不同逆境脅迫過程中的表達模式，為下一步進行蛋白質(zhì)功能的研究奠定基礎(chǔ)。
　　

3、 材料與方法:水稻種子在37℃浸種48 h，萌發(fā)的水稻幼苗在光照培養(yǎng)箱中生長，培養(yǎng)條件為溫度28℃，光照/黑暗周期為14/10 h，培養(yǎng)液為1/2 Hogland。以培養(yǎng)14d的材料進行各種脅迫處理，以未經(jīng)脅迫正常生長的水稻為對照。對候選基因編碼的蛋白質(zhì)進行抗原決定簇預(yù)測，合成多肽后免疫兔子制備多克隆抗體。用Western Blotting檢測CBL基因編碼蛋白質(zhì)在水稻品種9311苗期的不同脅迫條件下的表達及差異。
　　 結(jié)果

4、:利用Western Blotting檢測了6個CBL基因編碼蛋白質(zhì)在水稻葉片不同脅迫處理的表達，揭示了其表達模式。發(fā)現(xiàn)了CBL1、CBL2、CBL5、CBL6、CBL8和CBL10這6個蛋白質(zhì)的表達發(fā)生變化在不同品種的不同脅迫的不同時期，其余蛋白質(zhì)用抗體檢測未發(fā)現(xiàn)變化。
　　 結(jié)論:通過對CBL在葉片脅迫過程中的表達分析，鑒定到在非生物逆境脅迫下表達發(fā)生變化的6個水稻CBL蛋白質(zhì)，其中，OsCBL1、OsCBL5和OsCBL6