山東沿海潮間帶綠藻形態(tài)及分子鑒定.pdf

1、山東沿海潮間帶有著豐富的藻類資源，這些藻類本身是海洋生物的天然庇護和攝食場所，同時它們也是潮間帶生物群落結構中關鍵的環(huán)節(jié)，在眾多藻類中，有的形態(tài)差異明顯，但可能是不同生活史中的不同階段、有的形態(tài)幾乎無差別但其基因型卻是有所不同，這對潮間帶藻類分類工作造成了種種困難，從事潮間帶綠藻的分類鑒定方向的研究較少，故相關分類學信息不夠完善，而在綠藻鑒定工作中，石莼屬又因其種間形態(tài)上差別細微，并加之被證明是近年來各地頻繁發(fā)生的綠藻自然災害的主要物種

2、，所以引起了世界各國藻類分類學者更多的關注。通過研究相關藻種的分類地位，精確的鎖定有研究價值的藻種，為接下來的防治與開發(fā)利用等工作奠定了理論依據。
　　 本研究對山東地區(qū)的沿海潮間帶逐月進行了大型綠藻樣品的采集工作，將采得樣品進行形態(tài)學及分子生物學的鑒定，分析了樣品之間形態(tài)學和相關基因序列的差異，從而確定樣品的分類學地位，了解青島沿海的主要綠藻藻種的情況，為大規(guī)模綠潮爆發(fā)的機理提供了理論的借鑒。
　　 首先，研究運用形態(tài)

3、學觀察及普通、冷凍切片技術對采集的不同的綠藻樣品的藻體形態(tài)、顏色和質地、基部、中部、尖端的形態(tài)、細胞的排列和大小，葉綠體的在細胞中的位置等做了細致的分析，查閱圖鑒及國內外形態(tài)學研究資料，進行形態(tài)學的分類后鑒定出5屬13種。
　　 然后，本研究運用DNA條形碼技術，選取了tufA(elongation factor Tu)，ITS(internal transcribed spacer)，rbcL(ribulose-1，5-bis

4、phosphate carboxylase large/oxygenase subunit)三個基因設計引物(片段長度均在800bp左右)對采集的樣品進行PCR擴增，根據測序結構對以上三個基因作為綠藻分類條形碼的可行性做了系統的分析，結果表明，trfA基因的擴增范圍相對較廣，擴增成功率較高，序列分為10個分枝，分別是Ulva procera(Linza)，Ulva prolifera，Ulva flexuosa，Ulva laetevi

5、rens，Ulva compressa，Ulva australis，Ulva sp，Monostrma sp，Codiumfragile，HQW-20110710-1。而ITS，rbcL則有更高的種屬間特異性。其中ITS為了7枝，7枝所代表的物種分別為Ulva prolifera，Ulva linza，Ulva laetevirens，Ulva australis(Ulva pertusa)，Ulva compressa，Monost

6、roma arcticum，RZ-20111206-4。rbcL序列信息構建進化樹后分為了7枝。7枝所代表的物種分別為歸在Ulva prolifera，Ulva australis(Ulva pertusa)，Ulva preceral，Ulva precera2，HQW-20110902-4與ZQ-20110403-1、YT-20111205-2，Ulva laetevirens中。
　　 最后，將形態(tài)學的鑒定結果與DNA條形