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文檔簡介
1、通過對(duì)多殺菌素產(chǎn)生菌刺糖多孢菌(SaccharopolysporaSpinosa)G9菌株進(jìn)行分離復(fù)壯,得到一株遺傳性能較穩(wěn)定的菌株G9-34,以G9-34為出發(fā)菌株,進(jìn)行紫外線物理誘變和NTG化學(xué)誘變,得到了抗PG的菌株A-N112(183ug/ml)和抗納他霉素菌株N-N252(172ug/ml)比出發(fā)菌株G9提高了37%和29%。然后進(jìn)行3輪基因組重排后得到了F235效價(jià)為208ug/ml,比親本G9(133ug/ml)提高了49
2、.64%。傳代試驗(yàn)表明F235傳代比較穩(wěn)定。
以F235菌株為試驗(yàn)菌株進(jìn)行發(fā)酵配方篩選,摸索出適合固體發(fā)酵的不同氮源、不同碳源、及其他因素對(duì)多殺菌素生物合成的影響,通過六因子十水平的均勻設(shè)計(jì)試驗(yàn),爬坡試驗(yàn)以及響應(yīng)面的試驗(yàn),對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行了優(yōu)化。在優(yōu)化的培養(yǎng)基中,多殺菌素的產(chǎn)素水平為526ug/ml,與優(yōu)化前的原始培養(yǎng)基205ug/mL比較,優(yōu)化后的培養(yǎng)基可以使效價(jià)提高152.9%。多殺菌素的固體發(fā)酵最優(yōu)培養(yǎng)基配方為:葡萄糖8
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