烏骨山羊胚胎移植及群體遺傳分化水平的研究.pdf

1、本研究采用超數(shù)排卵、同期發(fā)情及群體遺傳分化分析的方法研究烏骨山羊，以期待從育種水平和分子水平為烏骨山羊品系快速擴(kuò)大、品種保護(hù)、評價、利用等提供參考。
　　 實驗一以烏骨山羊為實驗對象，在湖北省通山縣優(yōu)美特生態(tài)農(nóng)場進(jìn)行烏骨山羊胚胎移植實驗，結(jié)果表明：
　　 1.對供體羊注射不同產(chǎn)地的進(jìn)口FSH，超排劑量為9.6mg，平均采胚數(shù)為8.11±3.18，平均可用胚數(shù)為6.22±1.43，可用胚比率達(dá)到71.23±20.32%；新

2、西蘭產(chǎn)FSH與加拿大產(chǎn)FSH的超排結(jié)果差異不顯著，即不同產(chǎn)地的FSH對超排結(jié)果沒有顯著影響，在實際生產(chǎn)中可以考慮國產(chǎn)的FSH以降低經(jīng)濟(jì)成本。
　　 2.采用CIDR+PG+PMSG方法處理受體，誘導(dǎo)同期發(fā)情，可以獲得良好的效果。澳大利亞生產(chǎn)的PMSG發(fā)情率達(dá)到88.6%，寧波生產(chǎn)的PMSG發(fā)情率只達(dá)到了75.9%，相比較同期發(fā)情結(jié)果，澳大利亞的PMSG效果明顯優(yōu)于國產(chǎn)，并且差異顯著(P<0.05)。
　　 3.應(yīng)用進(jìn)口栓

3、進(jìn)行同期發(fā)情實驗，受體母羊發(fā)情主要集中在撤栓后的24～48h處，集中發(fā)情率最高達(dá)到54.5%。
　　 4.三個山羊品種相比較同期發(fā)情效果，黑山羊發(fā)情率達(dá)到85%，波爾山羊為80%，奶山羊為86.1%，奶山羊略優(yōu)于其他兩個山羊品種，但三者之間差異并不顯著(P>0.05)
　　 5.分別給受體母羊移植1枚、2枚、3枚鮮胚，妊娠率分別為63.6%、60.0%、57.1%，移植1枚、2枚和3枚鮮胚的受胎率差異顯著(P<0.05)

4、。從胚胎利用最大程度化來講，可以移植1枚A級胚胎，對等級較低的胚胎則可以適當(dāng)多移植幾枚。
　　 6.黃體直徑大于0.5cm受體的妊娠率為62.50%，直徑在0.3cm～0.5cm之間的黃體妊娠率為57.12%，直徑小于0.3cm的黃體妊娠率為66.67%，三組之間的差異不顯著，黃體的大小不影響妊娠率。
　　 實驗二本研究利用烏骨山羊、樂至黑山羊、建昌黑山羊、遼寧絨山羊、成都麻羊、承德無角山羊、南江黃羊、奴比山羊、馬頭山羊

5、、波爾山羊、簡陽大耳羊、北川白山羊、湘東黑山羊、金堂黑山羊共計14個山羊品種為材料，PGR、GnRHR、FSHβ、INHβA、LHβ為候選基因，采用PCR-SSCP技術(shù)檢測SNP位點，并通過基因頻率和基因型頻率進(jìn)行群體遺傳分化水平分析，為烏骨山羊的遺傳評估做了初步的分析。研究結(jié)果表明：
　　 1.在5個候選基因中共檢測到6個SNP位點，分別為PGR基因5’調(diào)控區(qū)中的-31G/A突變；GnRHR外顯子1中714bp處缺失A，731

6、bp處插入G；FSHβ基因中5’調(diào)控區(qū)中的-856G/T突變；INHβA外顯子2中的80T/C突變；LHβ外顯子2中的153C/A和64T/C突變。6個SNP位點依次命名為PGR、GnRHR、FSHβ、INHβA、LHβ-1、LHβ-5。
　　 2.6個SNP位點在不同的山羊品種中的基因型分布差異顯著(P<0.05)。6個多態(tài)位點為中性座位，14個山羊品種的群體觀察雜合度(Ho)為0.2172～0.6830；期望雜合度(He)為

7、0.2100～0.4571；有效等位基因數(shù)(Ne)為1.4241～1.8329；多態(tài)信息含量為0.1990～0.3348；Shannon多樣性指數(shù)0.4092～0.6734。
　　 3.14個山羊群體的F-統(tǒng)計結(jié)果顯示：Fit為-0.576；Fst為0.029；Fis為-0.623。表明2.9%的遺傳變異是群體間變異，而97.1%遺傳變異是群體內(nèi)變異。絕大部分變異存在于各品種內(nèi)，說明品種間遺傳分化程度非常低。
　　 4.

8、烏骨山羊的觀察雜合度(Ho)為0.2818，期望雜合度(He)為0.3110，Ho小于He，表明在烏骨山羊群體內(nèi)純合子個體較多，種群可能受選擇、突變和遺傳漂變等因素的影響。
　　 5.基于Nei氏標(biāo)準(zhǔn)遺傳距離聚類分析表明，國外品種聚為一類，馬頭山羊單獨(dú)聚為一類，其他的11個山羊品種聚為3類。馬頭山羊與樂至黑山羊的遺傳距離最大為0.2829，Nem最小0.778；在整個山羊群體中，烏骨山羊與簡陽大耳羊的遺傳距離最小為0.0105，