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文檔簡介
1、豬細(xì)小病毒(PPV)與偽狂犬病毒(PRV)是引起豬繁殖障礙的兩個(gè)主要病原。PPV和PRV引起的疾病在我國有很高的感染率和發(fā)病率,給我國的養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。傳統(tǒng)的常規(guī)疫苗對防制PPV和PRV的感染有一定的效果,但是存在不可避免的缺陷,為了更好的控制PPV和PRV感染,研制更加安全有效的PPV-PRV二價(jià)基因工程疫苗是解決這一問題的最好途徑。 偽狂犬病病毒基因組為一雙鏈、線狀DNA,在長約150kb的基因組上存在許多與病毒
2、復(fù)制無關(guān)的非必需基因,這些基因可供外源基因的插入,而使之成為活載體疫苗。以含PPVNADL-2株全部序列的GH質(zhì)粒為模板,擴(kuò)增了完整的PPVVP2基因和部分VP1基因,并將其連接到PGEM-TEasy載體中,構(gòu)建了重組質(zhì)粒pVP2。為了構(gòu)建豬細(xì)小病毒和偽狂犬病毒重組病毒,我們根據(jù)AnaI.Ranz等報(bào)道的PPVNADL-2株病毒基因組序列設(shè)計(jì)了一對包含其結(jié)構(gòu)蛋白VP2基因的PCR引物,以復(fù)制型DNA為模板,通過PCR擴(kuò)增出長約2.114
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