豬偽狂犬病、細(xì)小病毒病和乙型腦炎三聯(lián)滅活疫苗的研制.pdf

1、病毒性傳染病是誘發(fā)母豬繁殖障礙性疾病的主要因素之一，其中豬偽狂犬病、細(xì)小病毒病和乙型腦炎等均可導(dǎo)致妊娠母豬流產(chǎn)，產(chǎn)死胎、木乃伊胎，本研究旨在從生產(chǎn)實(shí)際出發(fā)，探討制備一種針對這三種豬繁殖障礙性疾病的多聯(lián)滅活疫苗，擬達(dá)到簡化免疫程序、降低免疫成本、減小免疫刺激，起到一針防多病的臨床應(yīng)用效果。疫苗的研制及檢驗(yàn)結(jié)果如下：
　　 1.三聯(lián)滅活疫苗的制備通過在傳代細(xì)胞上接毒，收獲TCID50為10-6.5/0.1mL的豬偽狂犬病毒液8000

2、mL.HA為29細(xì)小病毒液8000mL，將病毒液滅活后分別通過透析和超濾這兩種不同的方法進(jìn)行濃縮，再與稀釋過的乙型腦炎病毒液等體積混合，將混合后的病毒液與一定比例的佐劑混勻，通過組織搗碎機(jī)和膠體磨兩種不同的乳化設(shè)備進(jìn)行乳化，共試制了豬偽狂犬病、細(xì)小病毒病和乙型腦炎三聯(lián)油乳劑滅活疫苗2個批次，一個批次為1000mL，另一個為3000mL。
　　 2.三聯(lián)滅活疫苗的檢驗(yàn)對試制疫苗進(jìn)行物理性狀及細(xì)菌檢驗(yàn)均符合疫苗檢驗(yàn)要求。將試制疫苗接

3、種妊娠母豬、后備母豬及Balb/C小鼠，接種后試驗(yàn)動物采食生長正常，無異常反應(yīng)，妊娠母豬無流產(chǎn)、產(chǎn)死胎和木乃伊胎的記錄。將試制三聯(lián)滅活疫苗進(jìn)行Balb/C小鼠的免疫與效力保護(hù)性試驗(yàn)，小鼠在二免后21d，PRV平均中和抗體指數(shù)達(dá)到1：28.5，用105.0TCID50的豬偽狂犬強(qiáng)毒足墊部位攻擊小鼠，疫苗對小鼠保護(hù)率達(dá)到90％；用試制三聯(lián)滅活疫苗進(jìn)行KM小白鼠的免疫與效力保護(hù)性試驗(yàn)，二次免疫后21d用105.84PFU的P3株強(qiáng)毒對小鼠進(jìn)行

4、腹腔攻毒，疫苗對小鼠的保護(hù)率達(dá)到80％；用試制的三聯(lián)滅活疫苗免疫豚鼠，二次免疫后10周，豚鼠的PPVHI抗體水平仍然維持在1：210以上。
　　 3.三聯(lián)滅活疫苗對豬的免疫原性試驗(yàn)將試制三聯(lián)滅活疫苗免疫6月齡的后備母豬發(fā)現(xiàn)，產(chǎn)生的豬偽狂犬病毒ELISA抗體平均水平和豬偽狂犬病毒單價滅活疫苗所產(chǎn)生的抗體水平相當(dāng)；三聯(lián)滅活疫苗產(chǎn)生的細(xì)小病毒HI抗體水平要高于豬細(xì)小病毒滅活疫苗；豬乙型腦炎病毒的ELISA抗體水平低于豬乙型腦炎弱毒疫苗