埋植雌二醇對(duì)雌性中華鱘幼魚血清生理指標(biāo)及卵巢發(fā)育的影響.pdf

1、中華鱘(Acipenser sinensis)是一種江海洄游性大型魚類,其產(chǎn)卵場(chǎng)主要分布在長(zhǎng)江,雌性性成熟年齡為14-26齡,物種目前處于瀕危狀況。規(guī)?；酿B(yǎng)殖始于上世紀(jì)90年代,目前已有中華鱘全人工繁殖的報(bào)道,但其性腺發(fā)育的過(guò)程和機(jī)制并不十分清楚,人們也希望找到加快中華鱘性腺發(fā)育的途徑。本學(xué)位論文主要研究埋植雌二醇(estradiol,E2)對(duì)雌性中華鱘幼魚血清生理指標(biāo)、性類固醇類激素和卵巢發(fā)育的影響,其次觀察了雌性幼魚血清生理指標(biāo)的

2、周年變化以及中華鱘幼魚的生長(zhǎng)特性。主要結(jié)果如下:
　　1、用硅橡膠做載體,將劑量30 mg/kg的雌二醇埋植入人工養(yǎng)殖11齡、平均體重46.00 kg的雌性中華鱘的背部肌肉內(nèi)。埋植前及埋植后的第30、120、200天從尾部取血,測(cè)定血清中總蛋白(total protein,TP)、白蛋白(albumin,ALB)、球蛋白(globulin,GLB)、甘油三酯(triglyceides,TG)、總膽固醇(total choleste

3、rol，TCH)、血糖(glucose,GLU)和卵黃蛋白原(vitellogenin,VTG)的含量。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,與對(duì)照組相比,除血糖含量無(wú)顯著變化外,實(shí)驗(yàn)組魚血清中總蛋白、白蛋白、球蛋白、甘油三酯、總膽固醇和卵黃蛋白原的含量顯著升高。此結(jié)果為進(jìn)一步探索外源物質(zhì)促進(jìn)中華鱘卵巢發(fā)育的可能途徑,奠定前期基礎(chǔ)。
　　2、在上述實(shí)驗(yàn)體系中,檢測(cè)了中華鱘血清性激素含量。結(jié)果發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組魚血清中的T含量顯著低于對(duì)照組(P>0.05)。而實(shí)驗(yàn)

4、組與血清中E2含量先是上升,然后下降,第30時(shí)為最大值。這些結(jié)果顯示外源雌激素可能能夠刺激卵巢使其產(chǎn)生內(nèi)源性的雌性激素,而抑制T的產(chǎn)生,進(jìn)而促進(jìn)卵巢的發(fā)育。
　　3、在上述實(shí)驗(yàn)體系中,實(shí)驗(yàn)開(kāi)始和埋殖后第120d,通過(guò)外科手術(shù)取得卵巢組織,波恩氏液固定,石蠟包埋,5um的厚度切片,伊紅-美藍(lán)染色,光鏡下觀察記錄卵徑。結(jié)果發(fā)現(xiàn):實(shí)驗(yàn)開(kāi)始時(shí)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組魚的卵徑并無(wú)顯著差異,而在第120時(shí),實(shí)驗(yàn)組魚的卵徑要顯著大于對(duì)照組魚。這說(shuō)明外源雌

5、二醇可以促進(jìn)中華鱘的卵巢發(fā)育。
　　4、用硅橡膠做載體,將劑量20 mg/kg的E2埋植入人工養(yǎng)殖4齡、平均體重15.0kg的中華鱘的背部肌肉內(nèi)。埋植后的第30天取肝臟組織。設(shè)計(jì)簡(jiǎn)并引物,建立并使用RT-PCR技術(shù)來(lái)研究中華鱘肝臟卵黃蛋白原基因的表達(dá),結(jié)果發(fā)現(xiàn),雌二醇處理組的VTG基因表達(dá)量顯著增加,而雄魚中未發(fā)現(xiàn)VTG的mRNA。
　　5、每個(gè)季度逐尾給中華鱘尾部取血,測(cè)定其血清中TP、ALB、GLB、TCH、TG、VTG

6、、GLU的含量。結(jié)果發(fā)現(xiàn):血清中TP、ALB、GLB、TCH、TG、VTG的含量都隨季節(jié)顯著變化;TP、ALB、GLB的含量在春季時(shí)最高,夏、秋季逐漸降低;TCH和TG在春、秋兩季最高;GLU含量在不同季節(jié)沒(méi)有顯著變化;VTG含量在秋季時(shí)達(dá)到最高。
　　6、采用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法,以長(zhǎng)江三峽庫(kù)區(qū)網(wǎng)箱養(yǎng)殖的1-7齡中華鱘為材料,分析了中華鱘幼魚的生長(zhǎng)特性。在人工養(yǎng)殖條件下,1-7齡中華鱘呈連續(xù)生長(zhǎng),其平均全長(zhǎng)和體重由1齡的91.36cm、3